Anticorpo policlonal de coelho anti-FBXO28 para WB, ELISA - Q9NVF7

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do FBXO28

• Atua como componente de reconhecimento de substratos do complexo ligase E3 de ubiquitina do tipo SCF (proteína SKP1-CUL1-F-box), direcionando TOP2A, RAB27A ou a si próprio para ubiquitinação e degradação proteassômica. Referências relacionadas: PMID:27754753 PMID:31678254
• Regula a atividade de desconcatenação da topoisomerase II alfa (TOP2A) e desempenha um papel crítico na manutenção da estabilidade genômica. Referências relacionadas: PMID:27754753
• Participa do metabolismo lipídico e da inflamação ao mediar a degradação ubiquitinada de RAB27A (por similaridade).
• Regula fortemente a sobrevivência das células beta sem afetar significativamente a secreção de insulina. Referências relacionadas: PMID:29587369
• É essencial para a morfologia do fuso e a migração do fuso baseada em actina, provavelmente por meio da via de sinalização ARPC2/ARP3 (por similaridade).
• Localiza-se no centrômero, no cinetócoro e no núcleo, em concordância com suas funções na dinâmica cromossômica e na divisão celular.
• Contém um domínio F-box característico que medeia a interação com SKP1, conectando os substratos ao complexo ligase de ubiquitina SCF.
• O gene sofre splicing alternativo, potencialmente produzindo isoformas proteicas com propriedades regulatórias distintas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 91–312 do FBXO28 humano (NP_055991.1), uma região provavelmente conservada entre as isoformas; anticorpos policlonais podem reconhecer múltiplas variantes de splicing.
• Para Western blotting, uma banda esperada próxima de 41 kDa (peso molecular calculado) é típica; no entanto, verifique a especificidade da banda no sistema de amostra relevante, pois modificações pós-traducionais ou isoformas podem alterar a mobilidade.
• No ELISA, considere utilizar FBXO28 recombinante ou lisados celulares com controles negativos apropriados e otimize as condições de revestimento e detecção para o seu ensaio.
• Foi relatada reatividade cruzada com amostras humanas e de rato; para outras espécies, recomenda-se a validação devido à possível divergência de sequência.
• Como o FBXO28 está envolvido nas vias da ubiquitina-proteassoma, o tratamento das células com inibidores do proteassoma, como MG132, pode estabilizar as proteínas-alvo e aumentar a detecção de intermediários de ubiquitinação, caso sejam estudados.

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