Anticorpo Policlonais Anti-FCAR para WB, IF/ICC, ELISA - P24071

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FCAR (CD89)

• FCAR, também conhecido como CD89, é uma glicoproteína transmembrana do tipo I e o receptor da imunoglobulina alfa (IgA), pertencente à superfamília das imunoglobulinas.
• A proteína medeia funções efetoras imunológicas como produção de citocinas, fagocitose e degranulação após se ligar a complexos imunes de IgA.
• O FCAR é expresso de forma diferenciada em células mieloides: monócitos expressam todas as três isoformas principais (A.1, A.2, A.3), enquanto macrófagos alveolares normalmente expressam apenas uma isoforma de superfície.
• A localização subcelular inclui a membrana celular; além disso, formas secretadas podem ser geradas por splicing alternativo ou descascamento proteolítico.
• As características estruturais principais incluem dois domínios extracelulares semelhantes a Ig, uma única hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática curta sem motivos de sinalização clássicos; a sinalização ocorre por associação com a cadeia γ comum do receptor Fc.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada em múltiplos sítios e formação de pontes dissulfeto, contribuindo para a estabilidade e a ligação ao ligante.
• Estudos funcionais associam o FCAR tanto à imunidade sistêmica quanto à mucosa, com papéis nas respostas inflamatórias e na regulação da homeostase imunológica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 60-287), que é previsto como bem exposto para detecção. Para Western blot, considere que o peso molecular observado pode ser maior (~45-65 kDa) devido à glicosilação.
• Para IF/ICC, use permeabilização se estiver almejando a cauda citoplasmática ou se a isoforma for predominantemente intracelular; para coloração de superfície, a marcação de células vivas com o anticorpo pode ser viável.
• Como o FCAR é expresso em células mieloides primárias, amostras de controle positivo relevantes incluem células mononucleares do sangue periférico humano (PBMCs) ou lisados de baço de camundongo.
• Aplicações em ELISA podem ser otimizadas usando proteínas de fusão recombinantes FCAR-Fc como captura/padrão; observe que o anticorpo detecta tanto as formas ligadas à membrana quanto as solúveis.
• A reatividade cruzada com camundongo é reportada; no entanto, a homologia de sequência no domínio extracelular é de apenas cerca de 50%, então valide em sua cepa e tecido específico de camundongo.

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