Anticorpo Policlonale de Coelho Anti-FCGR2B para WB, IF-P, ELISA - P31994

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FCGR2B

• O FCGR2B, também conhecido como CD32, FcγRIIB ou CD32B, é um receptor de baixa afinidade para a região Fc da imunoglobulina gama (IgG) complexada ou agregada. É membro da superfamília das imunoglobulinas.
• O receptor existe como múltiplas isoformas (por exemplo, IIB1 e IIB2) produzidas por splicing alternativo. A isoforma IIB1 não possui motivos para endocitose e fagocitose, enquanto a isoforma IIB2 não desencadeia a fagocitose após a ligação ao ligante.
• O FCGR2B desempenha um papel imunorregulador chave ao modular negativamente a ativação celular desencadeada por receptores de células B (BCR), receptores de células T (TCR) ou outros receptores Fc, moldando assim a produção de anticorpos e o processamento de imunocomplexos.
• Ele está principalmente localizado na membrana celular como uma proteína transmembranar de tipo I de passagem única, com uma região extracelular contendo dois domínios do tipo imunoglobulina, uma hélice transmembranar e uma cauda citoplasmática.
• A proteína está amplamente distribuída nas linhagens mieloides e linfoides, incluindo monócitos, neutrófilos, macrófagos, basófilos, eosinófilos, células de Langerhans, células B, plaquetas e células endoteliais placentárias. Não é detectada em células assassinas naturais.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada, formação de pontes dissulfeto e fosforilação, que regulam sua atividade e interações.
• Variações genéticas e rearranjos cromossômicos envolvendo o FCGR2B foram associados a condições autoimunes como o lúpus eritematoso sistêmico (LES).
• Além disso, o FCGR2B atua como proto-oncogene e está implicado nas interações hospedeiro-vírus, destacando seu papel multifacetado na imunidade e na doença.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 43–217 do domínio extracelular, visando uma região crítica para a ligação do ligante; considere verificar a acessibilidade do epítopo em condições nativas versus desnaturadas para aplicações como IF-P versus WB.
• Para western blotting, o peso molecular previsto é de ~34 kDa, mas as bandas reais podem sofrer deslocamento devido à glicosilação; inclua controles positivos e negativos adequados no seu desenho experimental.
• Na imunofluorescência em seções embebidas em parafina (IF-P), otimize as etapas de recuperação de antígeno e permeabilização para garantir a detecção da proteína ligada à membrana.
• Ao realizar o ELISA, avalie a reatividade cruzada com outros membros da família FcγR e valide a especificidade na matriz de amostra relevante (por exemplo, soro, lisados celulares).
• Dada a ampla reatividade cruzada com humano, camundongo e rato, confirme os perfis de reatividade espécie-específicos no seu sistema de ensaio, especialmente ao sondar alvos de baixa abundância.
• Como é um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser monitorada; recomendamos testar cada novo lote em um estudo piloto antes de experimentos em larga escala.

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