Anticorpo Policlonal Anti-FEN-1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P39748

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da FEN-1

• A FEN-1 (Flap endonuclease 1), também conhecida como DNase IV, MF1 ou RAD2, é uma nuclease específica de estrutura com atividades de endonuclease de flap 5' e exonuclease 5'-3'.
• Desempenha um papel crítico na replicação do DNA, clivando estruturas de flap salientes em 5' geradas durante o processamento do fragmento de Okazaki, deixando uma quebra para ligação.
• Participa na via de reparo por excisão de base de remendo longo (LP-BER), clivando dentro de flaps terminados em sítio AP.
• Atua como um fator de estabilização do genoma, impedindo que os flaps se equilibrem em estruturas que poderiam causar duplicações e deleções.
• Também exibe atividade de exonuclease 5'-3' em DNA de fita dupla com quebra ou lacuna e possui atividade de RNase H.
• Envolvida na replicação e reparo do DNA ribossomal (rDNA) e do DNA mitocondrial.
• A localização subcelular é predominantemente nuclear, incluindo o nucléolo e o nucleoplasma, mas também foi relatada localização mitocondrial.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, metilação e fosforilação, que podem regular sua função e interações.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 50-380 do FEN-1 humano, cobrindo a maior parte da proteína, o que pode contribuir para o reconhecimento de múltiplos epítopos.
• Para Western blot (WB), espere uma banda em aproximadamente 43 kDa; considere usar lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas ou de rato.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), é esperada marcação nuclear, mas a localização mitocondrial também pode ser observada; otimize as condições de fixação e permeabilização.
• Na imunoprecipitação (IP) e no ELISA, a natureza policlonal pode aumentar a eficiência de captura; valide com controles positivos e negativos apropriados.
• A reatividade cruzada com rato foi confirmada; para outras espécies, realize alinhamento de sequência e validação experimental antes do uso.
• Armazene a -20°C conforme recomendado para estabilidade de longo prazo; evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

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