Anticorpo Monoclonal Anti-FGFR4 para WB, ELISA - P22455

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FGFR4

• O receptor 4 do fator de crescimento de fibroblastos (FGFR4) é uma quinase de proteína tirosina que atua como receptor de superfície celular para os fatores de crescimento de fibroblastos (FGFs). Ele regula a proliferação celular, diferenciação, migração, metabolismo lipídico, biossíntese de ácidos biliares, captação de glicose, metabolismo da vitamina D e homeostase do fosfato.
• A ligação do ligante desencadeia a ativação de cascatas de sinalização a jusante, incluindo as vias PLCG1 e FRS2, levando à produção de segundos mensageiros (DAG, IP3) e ativação das vias RAS-MAPK e AKT.
• A sinalização do FGFR4 é regulada negativamente pela internalização e degradação do receptor; a protease de matriz MMP14 promove a internalização e degradação lisossomal do FGFR4. Mutações de ativação constitutiva ou inativação prejudicada levam à sinalização aberrante.
• O receptor se localiza na membrana celular, endossomos, retículo endoplasmático, e existe uma forma secretada. Ele é expresso em células epiteliais gastrointestinais, pâncreas e linhas celulares de câncer gástrico e pancreático.
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas, e a proteína sofre modificações pós-traducionais incluindo glicosilação, fosforilação e conjugação de ubiquitina (conjugação Ubl).
• Palavras-chave: Ligação a ATP, quinase, hélice transmembranar, domínio de imunoglobulina, ligação dissulfeto, glicoproteína, fosfoproteína e receptor.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Considerando que o imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região C-terminal (aminoácidos 700–802), o anticorpo provavelmente reconhece o FGFR4 de comprimento total, bem como isoformas que contêm esse epítopo. Considere realizar o alinhamento de sequência para verificar a conservação do epítopo entre as espécies.
• Para Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 88 kDa para o FGFR4 em amostras humanas, de camundongo e de rato. Use uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, 8–10% de SDS-PAGE) para uma resolução ideal. Considere começar com uma faixa de diluição do anticorpo primário de 1:1.000–1:5.000 e validar no seu sistema experimental.
• Para ELISA, titule o anticorpo para determinar a concentração de revestimento e as condições de detecção ideais. Certifique-se de que a proteína FGFR4 recombinante ou o antígeno peptídico correspondam à região do imunógeno para evitar falsos negativos.

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