Anticorpo Policlonal Anti-FH (Fumarato Hidratase) para WB, ELISA - P07954

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FH (Fumarato Hidratase)

• O FH catalisa a hidratação reversível de fumarato a L-malato no ciclo do TCA, uma etapa chave na produção de energia mitocondrial (PubMed:30761759). Referências relacionadas: PMID:30761759

• As isoformas citosólicas de FH participam do ciclo da ureia e do metabolismo da arginina, produzindo fumarato como subproduto (Por similaridade).

• O FH é anotado como um supressor tumoral e proteína variante da doença; mutações estão ligadas a síndromes de câncer hereditário, como HLRCC.

• Em resposta a danos no DNA, o FH é fosforilado por PRKDC e transloca para o núcleo, onde promove o reparo por NHEJ ao inibir a desmetilase KDM2B, levando ao aumento de H3K36me2 em DSBs (PubMed:20231875, PubMed:26237645). Referências relacionadas: PMID:20231875, PMID:26237645

• O FH localiza-se principalmente nas mitocôndrias, mas também no citosol; o acúmulo nuclear ocorre após danos no DNA (PubMed:26237645).

• O início alternativo produz diferentes isoformas que podem favorecer reações de hidratação ou desidratação (Provável).

• O FH é expresso em glóbulos vermelhos e é subexpresso em pacientes com anemia hemolítica não esferocítica hereditária de etiologia desconhecida.

• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação; a fosforilação mediada por PRKDC em DSBs é crítica para sua função de reparo de DNA.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 50–150 do FH humano; considere o uso de controles positivos, como lisados de HeLa ou HEK293T, para WB.
• Para Western blotting, deve ser observada uma banda específica em ~55 kDa; use controles de carregamento apropriados e marcadores de peso molecular.
• O fracionamento subcelular pode melhorar a detecção de pools de FH mitocondrial ou nuclear.
• Para ELISA, otimize o antígeno de revestimento e a titulação do anticorpo para obter as melhores relações sinal-ruído.
• A reatividade cruzada com FH de camundongo e rato permite estudos multiespécies; valide em seu sistema experimental.
• A pré-adsorção com o peptídeo imunizante pode confirmar a especificidade da banda.

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