Anticorpo Policlonal Anti-FH (Fumarato Hidratase) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P07954

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Fumarato Hidratase

• A FH catalisa a interconversão reversível e estereoespecífica de fumarato em L-malato, uma reação central para a produção de energia mitocondrial e vias metabólicas citosólicas. Referências relacionadas: PMID:30761759
• No ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) mitocondrial, a FH hidrata o fumarato em L-malato, contribuindo para a geração de NADH. No citosol, ela desidrata o L-malato em fumarato, apoiando o ciclo da ureia e o catabolismo da arginina.
• A iniciação alternativa da tradução produz isoformas mitocondriais e citosólicas, que podem exibir preferências catalíticas opostas de acordo com evidências de outras espécies (Provável).
• A FH participa do reparo de quebras de fita dupla de DNA translocando-se para o núcleo após dano ao DNA e promovendo a junção de extremidades não homólogas (NHEJ). Ela catalisa a formação de fumarato, que inibe a histona desmetilase KDM2B, levando à elevação de H3K36me2 e facilitando a montagem de proteínas de reparo. Referências relacionadas: PMID:20231875 PMID:26237645
• A localização subcelular abrange mitocôndrias, citoplasma, núcleo e cromossomo; o acúmulo nuclear é induzido por estresse genotóxico e fosforilação por PRKDC.
• A FH atua como um supressor tumoral; mutações na linhagem germinativa estão ligadas à leiomiomatose hereditária e câncer de células renais (HLRCC) e à deficiência de fumarato hidratase.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, regulam a atividade da FH e seu tráfego intracelular.
• A FH é expressa em glóbulos vermelhos, e níveis citoplasmáticos reduzidos foram observados em pacientes com anemia hemolítica hereditária não esferocítica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 45–510 do FH humano, englobando a maior parte da sequência proteica. Este projeto provavelmente detecta tanto as isoformas mitocondriais quanto as citosólicas.
• Para análise por Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 55 kDa. Múltiplas bandas podem aparecer devido a diferenças de isoformas ou modificações pós-traducionais; valide a especificidade usando controles apropriados.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize os protocolos de recuperação antigênica e fixação. Controles teciduais positivos e negativos que expressam FH em níveis conhecidos são recomendados.
• Em aplicações de ELISA, considere o uso da proteína FH recombinante como padrão para ensaios quantitativos e verifique a reatividade cruzada com proteínas homólogas de outras espécies.

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