Anticorpo Policlonal Anti-FHIT para WB, ELISA - P49789

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FHIT

• FHIT (proteína da tríade de histidina frágil) é membro da superfamília da tríade de histidina (HIT) e funciona como uma hidrolase de trifosfatos de dinucleosídeos, catalisando principalmente a hidrólise do trifosfato de diadenosina (Ap3A) em AMP e ADP (PubMed:12574506, PubMed:15182206, PubMed:8794732).

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• Também apresenta atividade de adenililsulfatase (PubMed:18694747) e atividade de adenosina 5'-monofosforamidase (PubMed:18694747), podendo ainda funcionar como uma adenililsulfato-amônia adenililtransferase (PubMed:26181368).

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• FHIT atua como supressor tumoral ao modular a ativação transcricional de CTNNB1 (PubMed:18077326), induzir apoptose por meio das vias SRC e AKT1 (PubMed:16407838) e inibir a degradação de p53/TP53 mediada por MDM2 (PubMed:15313915).

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• A proteína está localizada no citoplasma, nas mitocôndrias e no núcleo. A forma mitocondrial sensibiliza os transportadores de Ca²⁺, aumentando a captação de cálcio pelas mitocôndrias para promover a apoptose (PubMed:19622739).

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• FHIT é expresso em baixos níveis em todos os tecidos, com FHIT fosforilado detectado no fígado e nos rins, mas não no cérebro, pulmões ou linhagens celulares tumorais.

• É frequentemente deletado ou alterado em cânceres devido à sua localização no sítio frágil FRA3B, e sua expressão está associada a rearranjos cromossômicos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 25–147, representando quase toda a extensão da proteína FHIT, o que sugere uma ampla cobertura de epítopos.

• Para Western blot, a banda esperada é de aproximadamente 17 kDa; use um gel com porcentagem adequada e valide com controles positivos e negativos (por exemplo, linhagens celulares conhecidas por expressar ou não expressar FHIT).

• Ao realizar ELISA, considere utilizar a proteína recombinante usada como imunógeno como controle positivo para estabelecer curvas padrão.

• Como o anticorpo apresenta reatividade cruzada com o FHIT de camundongo, verifique a homologia na região do imunógeno entre as espécies para comparações quantitativas.

• FHIT pode estar presente em vários compartimentos subcelulares; o fracionamento ou a imunofluorescência podem fornecer dados de localização.

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