Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fibrilarina/U3 RNP para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P22087

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Fibrilarina/U3 RNP

• A fibrilarina é uma rRNA 2'-O-metiltransferase, também conhecida como antígeno da escleroderma nucleolar de 34 kDa, histona-glutamina metiltransferase e U6 snRNA 2'-O-metiltransferase fibrilarina.
• Ela catalisa a metilação site-específica do grupo 2'-hidroxila das porções de ribose no pré-RNA ribossômico, guiada por snoRNAs da caixa C/D. Referências relacionadas: PMID:30540930
• Atua como proteína metiltransferase ao metilar a histona H2A na glutamina 105 (H2AQ104me), o que impede a ligação do complexo FACT no locus do DNA ribossômico 35S. Referências relacionadas: PMID:24352239, PMID:30540930
• Metila o U6 snRNA em sítios 2'-O específicos dentro dos complexos RNP da caixa C/D, uma modificação essencial para a fidelidade do splicing de mRNA. Referências relacionadas: PMID:32017898
• É um componente integral do processomo da subunidade pequena (SSU), o primeiro precursor da subunidade ribossômica pequena, e é fundamental para a biogênese dos ribossomos. Referências relacionadas: PMID:34516797
• Localiza-se predominantemente no nucléolo e no nucleoplasma do núcleo.
• As modificações pós-tradução incluem acetilação, fosforilação, formação de ligação isopeptídica e conjugação com ubiquitina; a própria proteína também é metilada e contém domínios de ligação a RNA.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 34 kDa; use marcadores de peso molecular adequados para confirmação.
• A região do imunógeno (aminoácidos 222-321) apresenta conservação entre humano, camundongo e rato, o que sustenta a reatividade cruzada observada; valide o desempenho no seu sistema de amostra específico.
• Na imunofluorescência ou ICC, a localização nucleolar deve ser evidente; otimize as condições de fixação e permeabilização para detecção de alvos nucleares.
• Para imunoprecipitação, verifique a compatibilidade do anticorpo com o seu tampão de extração e considere incluir um controle sem anticorpo.
• Para aplicações de ELISA, avalie as condições de revestimento e use um controle positivo conhecido, como o peptídeo imunógeno, para estabelecer os parâmetros do ensaio.

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