Anticorpo Policlonal Coelho Anti-Fibrilarina/U3 RNP para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P22087

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Fibrilarina/U3 RNP

• A fibrilarina, codificada pelo gene FBL (também conhecido como FIB1, FLRN), é uma proteína nucleolar altamente conservada e foi originalmente identificada como o antígeno nucleolar de esclerodermia de 34 kDa.
• Funciona como uma metiltransferase dependente de S-adenosil-L-metionina que catalisa a metilação 2'-O específica do sítio dos resíduos de ribose no pré-RNA ribossômico (pré-rRNA), guiada por RNAs nucleolares pequenos (snoRNAs) da caixa C/D (Por similaridade). Referências relacionadas: PMID:30540930
• A fibrilarina é um componente central do processoma da subunidade pequena (SSU), o precursor mais antigo da subunidade ribossômica pequena, auxiliando no dobramento, modificações e clivagem do pré-rRNA. Referências relacionadas: PMID:34516797
• Além da metilação de RNA, a fibrilarina atua como uma metiltransferase de proteínas, mediando a metilação da histona H2A na glutamina 105 (H2AQ104me), o que prejudica a ligação do complexo FACT no locus do DNA ribossômico. Referências relacionadas: PMID:24352239, PMID:30540930
• Ela também catalisa a metilação 2'-O do RNA nuclear pequeno U6 (snRNA) dentro de complexos RNP da caixa C/D, uma modificação crítica para a fidelidade do splicing de pré-mRNA. Referências relacionadas: PMID:32017898
• Subcelularmente, a fibrilarina reside predominantemente no nucléolo, com presença adicional no nucleoplasma, refletindo seus papéis no processamento de RNA ribossômico e no splicing.
• As modificações pós-traducionais da fibrilarina incluem acetilação, fosforilação e metilação, bem como formação de ligação isopeptídica e conjugação do tipo ubiquitina, o que pode regular sua atividade e localização.
• A proteína tem um peso molecular de 33784 Da e é amplamente estudada como um marcador para a estrutura e função nucleolar.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 100-321) cobre uma região central da fibrilarina, que é altamente conservada entre as espécies; espera-se reatividade cruzada com camundongo, rato e macaco.
• No Western blot, uma banda principal em aproximadamente 34 kDa deve ser observada, correspondendo à proteína de comprimento total; bandas adicionais podem aparecer devido a modificações pós-traducionais ou isoformas.
• Para imunofluorescência, a fibrilarina se localiza no nucléolo e no nucleoplasma; a coloração conjunta com marcadores nucleolares como a nucleolina pode validar a especificidade.
• Para imunoprecipitação, otimize a concentração de anticorpo e as condições de incubação; considere usar extratos nucleares para enriquecer a proteína alvo.
• Execute controles apropriados (por exemplo, peptídeo bloqueador, lisados de nocaute) para confirmar a especificidade do anticorpo em seu sistema de ensaio.

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