Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Filaggrina (FLG) para IF-P, IHC-P, ELISA - P20930

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Filaggrina

• A filaggrina (FLG, também conhecida como FLG1, ATOD2, FLG-1) é uma proteína grande, altamente fosforilada codificada pelo gene FLG (GeneID: 2312) e desempenha um papel essencial na diferenciação terminal da epiderme.
• Agrega filamentos intermédios de queratina em macrofibrilhas densas e alinhadas, contribuindo para a integridade estrutural do estrato córneo.
• A filaggrina também promove a formação de ligações dissulfeto entre os filamentos intermédios de queratina, estabilizando ainda mais a rede de queratina durante a cornificação.
• A proteína localiza-se nos grânulos de querato-hialina citoplasmáticos na camada granulosa da epiderme e é libertada durante a diferenciação terminal para formar o envelope celular cornificado.
• A expressão é predominantemente na pele, particularmente no estrato granuloso, mas também é detetada noutros tecidos epiteliais, como o timo, estômago, amígdalas, testículo, placenta, rim, pâncreas, glândula mamária, bexiga, tiróide, glândula salivar e traqueia (PubMed:19384417, PubMed:1429717). Referências relacionadas: PMID:19384417 PMID:1429717
• As modificações pós-traducionais incluem extensa fosforilação, citrulinação e ligação de cálcio, que regulam o seu processamento proteolítico e função (Palavras-chave: Fosfoproteína, Citrulinação, Cálcio).
• Mutações no FLG estão associadas à ictiose vulgar e dermatite atópica (ATOD2), destacando a sua importância na função de barreira cutânea (Palavras-chave: Ictiose).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio recombinante abrange um fragmento da filaggrina humana; recomenda-se a validação da reatividade em modelos de tecido cutâneo humano endógeno para confirmar a especificidade.
• Para IHC-P, as condições de recuperação de antigénio podem requerer otimização devido à grande estrutura repetitiva da filaggrina; considere o uso de recuperação de epítopos induzida por calor a pH 6 ou 9.
• Para IF-P, a permeabilização com 0,1–0,3% de Triton X-100 é frequentemente eficaz para o acesso aos grânulos citoplasmáticos; teste o tempo de permeabilização e a concentração de detergente.
• Para ELISA, o emparelhamento com um segundo anticorpo contra um epítopo distante ou o uso de um formato sanduíche pode melhorar a sensibilidade; valide as condições do tampão de forma independente.

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