Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Filaggrina (FLG) para WB, ELISA - P20930

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Filaggrina

• A filaggrina (FLG) é uma proteína grande, altamente fosforilada e rica em histidina que serve como um componente estrutural chave na diferenciação epidérmica.
• Ela agrega filamentos intermediários de queratina em macrofibrilas densas e promove a formação de ligações dissulfeto, contribuindo para a resistência mecânica e a função de barreira da pele.
• A FLG é inicialmente sintetizada como profilaggrina e armazenada em grânulos de querato-hialina; upon diferenciação terminal, é processada proteoliticamente em peptídeos de filaggrina funcionais.
• A nível subcelular, a filaggrina localiza-se nos grânulos de querato-hialina citoplasmáticos dentro dos queratinócitos da camada granulosa.
• A expressão tecidual é predominantemente na pele (stratum granulosum), mas também detectada no timo, estômago, amígdalas, testículo, placenta, rim, pâncreas, glândula mamária, bexiga, tireoide, glândula salivar e traqueia, com ausência no coração, cérebro, fígado, pulmão, medula óssea, intestino delgado, baço, próstata, cólon e glândula adrenal. Na pele, é expressa principalmente no stratum granulosum da epiderme. Referências relacionadas: PMID:19384417 PMID:1429717
• Modificações pós-traducionais incluem extensa fosforilação e citrulinação, que regulam seu processamento e função.
• Mutações na FLG estão associadas à ictiose vulgar e dermatite atópica, destacando seu papel na manutenção da integridade da barreira cutânea.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-92) da FLG humana, o que pode reconhecer o precursor profilaggrina, bem como a filaggrina processada. Considere incluir inibidores de proteases durante o preparo da amostra para evitar degradação.
• Para Western blot, lisados de queratinócitos de pele humana (ex: células HaCaT sob diferenciação induzida por cálcio) ou extratos de tecidos da pele podem ser usados para detectar a profilaggrina de comprimento total de ~435 kDa e seus fragmentos proteolíticos. Valide o anticorpo no sistema de amostra relevante.
• Este anticorpo é adequado para ELISA; o emparelhamento com um anticorpo de detecção correspondente pode permitir imunoensaios sanduíche sensíveis para quantificação de filaggrina em fluidos biológicos ou sobrenadantes de células.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi confirmada; certifique-se de otimizar os protocolos específicos da espécie ao usar amostras não humanas.

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