Anticorpo Monoclonal Anti-Flt3/CD135 para FC, ELISA - P36888

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FLT3

• O FLT3 (tirosina quinase 3 semelhante a Fms), também conhecido como CD135, FLK2, STK1, é uma tirosina-proteína quinase do tipo recetor que atua como recetor de superfície celular para a citocina FLT3LG, desempenhando um papel central na regulação da diferenciação, proliferação e sobrevivência de células progenitoras hematopoiéticas e células dendríticas.
• Após a ligação do ligando, o FLT3 ativa múltiplas vias de sinalização a jusante, incluindo a fosforilação de SHC1 e AKT1, ativação de mTOR, sinalização RAS e cascatas MAPK/ERK, promovendo assim o crescimento celular e inibindo a apoptose.
• O FLT3 é um membro da família de recetores de tirosina quinase de classe III, caracterizado por uma região extracelular com cinco domínios semelhantes a imunoglobulinas, uma única hélice transmembranar e um domínio quinase intracelular; o splicing alternativo gera isoformas com propriedades distintas.
• A nível subcelular, o FLT3 localiza-se principalmente na membrana plasmática, com deteção também no lúmen do retículo endoplasmático, consistente com a sua biossíntese e tráfego membranar.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, fosforilação e conjugação de ubiquitina, que regulam a sua atividade, estabilidade e saída de sinalização; mutações que causam ativação constitutiva estão ligadas à leucemia mieloide aguda (LMA).
• A expressão tecidular é proeminente na medula óssea, particularmente em células estaminais hematopoiéticas, progenitores mieloides e progenitores de granulócitos/macrófagos; também é detetada no fígado, timo, baço, gânglio linfático e em níveis mais baixos no rim e pâncreas, com alta expressão na leucemia de células T.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange o domínio extracelular N-terminal (aminoácidos 27–163), sugerindo que este anticorpo monoclonal pode reconhecer o epítopo extracelular nativo, tornando-o potencialmente adequado para citometria de fluxo (FC) para detetar FLT3 na superfície celular.
• Para aplicações de ELISA, é aconselhável emparelhar este anticorpo com um anticorpo de deteção validado para estabelecer um ELISA sanduíche sensível; as concentrações de trabalho ideais devem ser determinadas experimentalmente para cada sistema de ensaio.
• Dada a glicosilação do FLT3 e a potencial dimerização, o western blot desnaturante pode requerer uma otimização cuidadosa; as variantes de peso molecular (108 e 113 kDa) refletem glicosilação diferencial ou formas precursoras.
• O anticorpo é específico para FLT3 humano; a reatividade cruzada com outras espécies ou com outras tirosina quinases recetoras deve ser verificada de forma independente na matriz de amostra relevante.

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