Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-FOXA1 para WB, IHC-P, ELISA - P55317

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FOXA1

• FOXA1 (proteína de caixa forkhead A1; HNF3A; TCF3A) é um fator de transcrição pioneiro que regula a expressão gênica ao abrir a cromatina e recrutar outros fatores de transcrição para regiões de potenciador/promotor.
• Liga-se ao DNA por meio de um domínio forkhead conservado que reconhece a sequência consenso 5'-[AC]A[AT]T[AG]TT[GT][AG][CT]T[CT]-3' e facilita programas transcricionais específicos de tipo celular dependentes de modificações de histonas como a H3K4me2.
• É essencial para o desenvolvimento embrionário de órgãos derivados do endoderma, incluindo fígado, pulmão, próstata e pâncreas; coopera com FOXA2 nesses processos.
• Modula a sinalização de receptores hormonais nucleares, sendo criticamente necessário para a ligação do ESR1 (receptor de estrogênio) aos promotores alvo no câncer de mama e para a regulação gênica dependente de estrogênio.
• Controla a sobrevivência e a proliferação celular ao reprimir o BCL2 (antiapoptótico) e ativar o CDKN1B (inibidor do ciclo celular p27/Kip1), em parte por meio da interação com BRCA1.
• Ativa a transcrição de genes específicos do fígado (albumina, AFP, PEPCK) e contribui para a homeostase metabólica, incluindo a regulação da glicose.
• Encontra-se predominantemente no núcleo; é altamente expresso na próstata, em tumores de mama positivos para ESR1 e superexpresso em adenocarcinomas de pulmão e esôfago.
• Sofre splicing alternativo e fosforilação, o que é consistente com sua regulação em múltiplos níveis.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 263-472) do FOXA1 humano, que inclui parte do domínio forkhead e do domínio de transativação; essa região é altamente conservada entre humanos, camundongos e ratos, o que sustenta a reatividade cruzada.
• Para WB, é esperada uma banda próxima a 49 kDa; considere usar extratos nucleares de tecidos ou linhas celulares que expressam FOXA1 (por exemplo, fígado, próstata, câncer de mama) e valide a especificidade do anticorpo com controles apropriados.
• A IHC-P pode exigir recuperação de antígeno e otimização da diluição do anticorpo; é esperada coloração nuclear. Valide em tecidos controle positivos, como fígado humano ou adenocarcinoma de próstata.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser testado como reagente de captura ou detecção; o emparelhamento com um anticorpo monoclonal anti-FOXA1 pode melhorar o desempenho do ensaio sanduíche após validação interna.

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