Anticorpo Policlonais de Coelho Anti-FOXO1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q12778

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FOXO1

• FOXO1 (Proteína da caixa de garfo O1, também conhecido como FKHR ou FOXO1A) é um fator de transcrição da família da caixa de garfo, com peso molecular de aproximadamente 70 kDa (previsão de 69,7 kDa).
• Ele atua como o principal alvo da sinalização por insulina, regulando a homeostase metabólica em resposta ao estresse oxidativo (PubMed:10358076, PubMed:12228231, PubMed:15220471). Referências relacionadas: PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• O FOXO1 se liga ao elemento de resposta à insulina (IRE) e ao elemento de ligação da família Daf-16 (DBE) para modular a transcrição de genes alvo, e sua atividade é suprimida pela insulina (PubMed:10358076). Referências relacionadas: PMID:10358076
• Suas funções principais incluem a promoção da gliconeogênese em hepatócitos por meio da cooperação com PPARGC1A e CEBPA (PubMed:17024043), o controle do balanço redox e da massa óssea, além da regulação do número de osteoblastos e da diferenciação condrogênica (Por similaridade). Referências relacionadas: PMID:17024043
• O FOXO1 é um regulador importante da morte celular, promovendo a apoptose em células neurais (PubMed:18356527), células do músculo liso cardíaco (PubMed:19483080) e a morte celular mediada por autofagia (PubMed:20543840). Referências relacionadas: PMID:18356527 PMID:19483080 PMID:20543840
• A localização subcelular é dinâmica: o FOXO1 trafega entre o citoplasma e o núcleo em resposta a modificações pós-traducionais como a fosforilação e a acetilação.
• Ele é expresso em abundância no músculo esquelético e no ovário, com níveis mais baixos em coração, placenta, pulmão, fígado, pâncreas, baço, testículo e intestino delgado, e expressão fraca no cérebro, timo, próstata e cólon (PubMed:9479491). Referências relacionadas: PMID:9479491
• O FOXO1 está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação, metilação e ubiquitinação, que modulam sua atividade transcricional e estabilidade.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 340–580 da região regulatória C-terminal do FOXO1, que contém sítios críticos de fosforilação e acetilação; portanto, este anticorpo pode detectar tanto as formas totais quanto as modificadas. Considere a validação com tratamento com fosfatase ou desacetilase ao avaliar estados específicos de modificação.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda em ~70 kDa; inclua controles positivos como lisados de HeLa, HepG2 ou músculo esquelético, pois o FOXO1 é fortemente expresso nesses tecidos.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), o FOXO1 se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, com translocação nuclear promovida por estresse oxidativo ou privação de soro. Otimize as condições de fixação e permeabilização para preservar a localização endógena.
• Para ELISA, considere o pareamento com um anticorpo de detecção direcionado a um epitopo distinto para aumentar a especificidade; confirme o desempenho usando a proteína FOXO1 recombinante.
• Como um anticorpo policlonal de coelho, pode ocorrer variabilidade entre lotes; a validação independente por meio de silenciamento mediado por siRNA ou um peptídeo de bloqueio é recomendada para experimentos críticos.

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