Anticorpo Policlonais Anti-FOXO3A para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9WVH4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de FOXO3A

• A proteína Forkhead box O3 (FOXO3A), também conhecida como Fkhr2 ou Foxo3a, é codificada pelo gene Foxo3.
• FOXO3A é um ativador transcricional que se liga à sequência consenso de DNA 5'-[AG]TAAA[TC]A-3', regulando a apoptose e a autofagia (PubMed:18054315, PubMed:18054316, PubMed:23805378). Referências relacionadas: PMID:18054315 PMID:18054316 PMID:23805378
• Ele regula positivamente a autofagia no músculo esquelético por desfosforilação, entrada nuclear e ativação de genes de autofagia como GABARAP1L e MAP1LC3B, levando à proteólise (PubMed:18054315, PubMed:18054316, PubMed:25402684). Referências relacionadas: PMID:18054315 PMID:18054316 PMID:25402684
• Em resposta ao estresse metabólico, FOXO3A se transloca para as mitocôndrias para promover a transcrição do mtDNA (PubMed:23283301). Referências relacionadas: PMID:23283301
• A proteína trafega entre o citoplasma, o núcleo e as mitocôndrias (matriz e membrana externa), com alterações de localização dependendo das condições celulares.
• A expressão tecidual inclui tecidos adiposos branco e marrom, fígado, rim, pulmão, cólon e músculo esquelético (PubMed:22510882, PubMed:29445193). Referências relacionadas: PMID:22510882 PMID:29445193
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação, que regulam sua atividade e estabilidade.
• Além disso, FOXO3A participa da regulação pós-transcricional de MYC via miR-34b/c, promove o compromisso condrogênico de progenitores esqueléticos (PubMed:32103177) e impulsiona a diferenciação de células T regulatórias ao ativar FOXP3. Referências relacionadas: PMID:32103177

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 371–470 de FOXO3A de camundongo; os anticorpos policlonais resultantes podem reconhecer múltiplos epitopos, tornando-os bem adequados para o Western Blot desnaturante, onde epitopos linearizados são expostos.
• Para WB, espera-se uma banda de aproximadamente 71 kDa; no entanto, a fosforilação e outras modificações podem deslocar ou criar bandas adicionais, portanto valide com controles apropriados e inibidores de fosfatase, se necessário.
• Para IF/ICC e IF-P, otimize as condições de fixação e permeabilização para garantir o acesso do anticorpo aos compartimentos nuclear e citoplasmático onde FOXO3A se localiza.
• Para ELISA, este anticorpo pode ser considerado como reagente de captura ou detecção, mas os usuários devem realizar titulações em tabuleiro de xadrez para determinar as concentrações de trabalho ideais.
• A reatividade cruzada foi confirmada com camundongo e rato; reações com outras espécies devem ser verificadas experimentalmente.

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