Anticorpo Policloonal de Coelho Anti-FTO para WB, IP, ELISA - Q9C0B1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FTO

• FTO (proteína associada à massa gorda e obesidade) é uma dioxigenase dependente de alfa-cetoglutarado que atua como desmetilase de RNA, catalisando a desmetilação oxidativa da N6-metiladenosina (m6A) no mRNA, U6 snRNA e na modificação m6A(m) da capa 5'. Referências relacionadas: PMID:22002720, PMID:25452335, PMID:26457839, PMID:30197295, PMID:28002401
• Também desmetila a N1-metiladenina nos tRNAs e pode reparar DNA/RNA alquilados in vitro, embora a relevância in vivo seja incerta. Referências relacionadas: PMID:30197295, PMID:18775698, PMID:20376003
• Ao modular os níveis de m6A, o FTO regula a estabilidade, o splicing e a tradução do mRNA, influenciando assim a adipogênese, o peso corporal e a homeostase energética. Referências relacionadas: PMID:18775698, PMID:26287746
• O FTO é expresso de forma ubíqua, com níveis mais elevados nas glândulas suprarrenais e no cérebro (particularmente no hipotálamo e na hipófise), e está superexpresso em certas leucemias mieloides agudas (LMA) com rearranjos genéticos específicos. Referências relacionadas: PMID:17434869, PMID:17496892, PMID:28017614
• A localização subcelular inclui o núcleo (com enriquecimento em speckles nucleares) e o citoplasma, refletindo seus papéis no processamento e tradução do RNA.
• O FTO pertence à família ALKBH de dioxigenases e contém um domínio de ligação a ferro e 2-oxoglutarato essencial para sua atividade catalítica.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e conjugação tipo ubiquitina, que podem regular sua estabilidade e atividade.
• O FTO atua como oncogene na LMA ao desmetilar e estabilizar mRNAs de fatores leucêmogênicos como MYC e CEBPA. Referências relacionadas: PMID:28017614, PMID:29249359

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 327–504 (região C-terminal) do FTO humano. É esperado que este anticorpo policlonal reconheça múltiplos epítopos, proporcionando detecção robusta em condições desnaturantes e nativas.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de ~58 kDa; valide a expressão em lisados de controle positivo (ex.: cérebro, linhagens celulares de LMA) e considere o uso de inibidores de fosfatase para preservar os estados de fosforilação.
• Na imunoprecipitação (IP), o anticorpo pode capturar complexos FTO–RNA; use condições de ligação cruzada ou sem RNase se interações RNA-proteína precisarem ser preservadas.
• Para ELISA, confirme a especificidade por meio de revestimento com FTO recombinante e ensaios de inibição competitiva; a reatividade cruzada listada com camundongo e rato permite projetos de estudo multiespécie.
• Ao comparar a expressão entre tecidos ou tratamentos, confira a carga igual e leve em conta a regulação dinâmica do FTO por vias metabólicas e de estresse.

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