Anticorpo Monoclonal Anti-Furina para WB e ELISA - P09958

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Furina

• A Furina (PCSK3) é uma endoprotease de serina dependente de cálcio pertencente à família das convertases de proproteínas, também conhecida como enzima de clivagem de resíduos de aminoácidos básicos pareados (PACE) e enzima de processamento dibásico.
• A Furina reconhece e cliva precursores polipeptídicos na sequência consenso RX(K/R)R, desempenhando um papel fundamental na maturação de proproteínas na via secretora constitutiva. Referências relacionadas: PMID:11799113, PMID:1629222, PMID:1713771
• Ela processa proteínas importantes, como o fator de crescimento transformador beta-1 (TGFB1) e o pró-hormônio do fator natriurético cerebral, convertendo-os em suas formas ativas. Referências relacionadas: PMID:7737999, PMID:20489134, PMID:21763278
• A Furina circula entre a rede trans-Golgi, a superfície celular e os endossomos, sendo também secretada em uma forma solúvel.
• A proteína sofre clivagem autocatalítica para gerar a enzima ativa e contém ligações dissulfeto, sítios de glicosilação e fosforilação que regulam sua função.
• A Furina é expressa de forma ubíqua nos tecidos humanos, refletindo seu papel central no processamento de uma ampla variedade de proteínas secretadas e de membrana.
• A Furina é explorada por numerosos patógenos para ativar suas proteínas de superfície, incluindo a gp160 do HIV-1, a hemaglutinina do vírus influenza e a proteína spike do SARS-CoV-2, tornando-a um alvo para pesquisas antivirais.
• Ao processar a subunidade acessória ATP6AP1 da V-ATPase, a Furina regula indiretamente a acidificação dos grânulos secretores nas células das ilhotas pancreáticas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dos aminoácidos 200–300; provavelmente o anticorpo reconhece um epítopo linear, tornando-o adequado para aplicações desnaturantes, como Western blot. Para aplicações nativas, como ELISA, valide a ligação em condições não desnaturantes.
• No Western blot, espere uma banda em torno de 87 kDa para a Furina de comprimento completo. Devido ao processamento da proproteína, também podem aparecer bandas adicionais correspondentes à proforma e às formas maduras clivadas.
• A expressão ubíqua permite que muitas linhagens celulares sejam utilizadas como controles positivos; considere células HeLa, HEK293 ou A549. A reatividade cruzada com camundongo é indicada, mas verifique a homologia da sequência na região do imunógeno ao testar outras espécies.
• Para ELISA, otimize as condições de revestimento e os títulos dos anticorpos, pois o imunógeno peptídico pode influenciar o reconhecimento da proteína nativa.

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