Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-FXR/NR1H4 para WB, IHC-P, ELISA - Q96RI1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de FXR/NR1H4

• FXR (NR1H4) é um receptor nuclear ativado por ligantes que funciona como sensor de ácidos biliares, ativado por ácidos biliares primários e secundários, incluindo ácido quenodesoxicólico (CDCA), ácido litocólico, ácido desoxicólico (DCA) e ácido alocólico (ACA). Referências relacionadas: PMID:10334992, PMID:10334993, PMID:21383957
• Coordena a homeostase hepática dos ácidos biliares regulando genes envolvidos na síntese, conjugação, transporte e desintoxicação. Por exemplo, reprime indiretamente CYP7A1 e CYP8B1 por meio de NR0B2/SHP, ativa SLC27A5/BACS e BAAT para a conjugação e induz ABCB11/BSEP, ABCC2/MRP2, ABCB4 e SLC10A1/NTCP para o transporte. Referências relacionadas: PMID:12754200, PMID:15471871, PMID:17895379, PMID:10514450, PMID:15239098, PMID:16269519
• No intestino, FXR promove a expressão e a secreção de FGF19, que sinaliza para o fígado reprimir CYP7A1, integrando assim a detecção intestinal de ácidos biliares à síntese hepática. Referências relacionadas: PMID:12815072, PMID:19085950
• FXR modula o metabolismo lipídico regulando genes como SREBF1 (lipogênese), PLTP (formação de HDL), SCARB1 (captação de HDL), APOE, APOC1, APOC4, PPARA (oxidação de ácidos graxos), VLDLR, SDC1 (captação de LDL/IDL), MTTP (montagem de VLDL), APOC2 (depuração de triglicerídeos), APOA1, ANGPTL3 e APOC3 (inibidores da depuração de triglicerídeos). Referências relacionadas: PMID:12554753, PMID:12660231, PMID:15337761, PMID:11579204, PMID:11927623, PMID:21804189, PMID:12891557
• Contribui para a homeostase da glicose ao suprimir a gliconeogênese hepática e modular a secreção e a sensibilidade à insulina. Referências relacionadas: PMID:20447400
• FXR desempenha um papel anti-inflamatório no fígado e no intestino, reduzindo a expressão de citocinas pró-inflamatórias e mediando a trans-repressão de citocinas induzidas por TLR4 por meio da prevenção, dependente de sumoilação, da remoção de N-CoR dos promotores de genes-alvo. Referências relacionadas: PMID:21242261, PMID:19864602
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas (por exemplo, FXRalpha1 e FXRalpha2) com distribuição tecidual distinta: o fígado expressa predominantemente isoformas do tipo FXRalpha1 (isoformas 3 e 4), enquanto o intestino e os rins expressam predominantemente isoformas do tipo FXRalpha2 (isoformas 1 e 2). Essas isoformas apresentam sensibilidade diferencial aos ligantes de ácidos biliares e perfis distintos de ativação de genes-alvo.
• FXR localiza-se predominantemente no núcleo, onde se liga a elementos de resposta como heterodímero com RXR. Está sujeito a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e sumoilação, que ajustam sua atividade transcricional e suas interações proteicas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1–230) do FXR/NR1H4 humano, o que pode permitir o reconhecimento de múltiplas isoformas. Para Western blot, espere múltiplas bandas correspondentes aos pesos moleculares relatados de 48, 54, 55 e 56 kDa; considere incluir controles positivos apropriados e marcadores de peso molecular.
• Para imunohistoquímica (IHC-P), recomenda-se a validação em tecidos com expressão conhecida de FXR, como fígado ou intestino. As condições de recuperação antigênica e a diluição do anticorpo devem ser otimizadas empiricamente para o tipo específico de amostra.
• O ELISA pode ser utilizado para a triagem ou quantificação de FXR em lisados celulares ou preparações de proteínas recombinantes. Recomenda-se a otimização específica da aplicação quanto ao formato do ensaio e à concentração do anticorpo.
• Ao trabalhar com amostras de camundongo ou rato, confirme a reatividade cruzada no sistema experimental relevante, pois foi relatado que o anticorpo apresenta reação cruzada com ambas as espécies.

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