Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-GAD65/GAD2 para WB, IF-P, ELISA - Q05329

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de GAD65/GAD2

• A descarboxilase do glutamato 2 (GAD2), também conhecida como GAD-65 ou descarboxilase do ácido glutâmico de 65 kDa, é uma enzima dependente de fosfato de piridoxal que catalisa a conversão de glutamato em GABA.
• GAD65 é essencial para a síntese do principal neurotransmissor inibitório GABA no sistema nervoso central, modulando a excitabilidade neuronal e a transmissão sináptica.
• A proteína é encontrada no citoplasma e associa-se às membranas do aparelho de Golgi, às vesículas citoplasmáticas e à membrana celular pré-sináptica.
• As modificações pós-traducionais incluem palmitoilação e fosforilação, que são fundamentais para o direcionamento subcelular e a regulação da atividade enzimática.
• Como uma proteína de membrana periférica, GAD65 alterna entre estados citosólico e ligado à membrana, um processo relacionado à dinâmica das vesículas sinápticas.
• Em consonância com seu papel na neurotransmissão, GAD65 é expressa principalmente em neurônios GABAérgicos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região C-terminal (aa 401-585) de GAD65 humano, que provavelmente contém epítopos conservados, em conformidade com a reatividade cruzada relatada com camundongo e rato.
• Para Western blotting, espere uma banda em aproximadamente 65 kDa; considere utilizar lisados de tecido cerebral ou linhagens celulares neuronais conhecidas por expressarem GAD65.
• Na imunofluorescência (IF-P), permeabilize as células para detectar tanto os pools citoplasmáticos quanto os associados à membrana; a coloração dupla com marcadores sinápticos pode confirmar a localização pré-sináptica.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, valide a consistência entre lotes no seu sistema de ensaio específico para garantir a reprodutibilidade.
• O anticorpo é aplicável a ELISA; otimize as condições de revestimento e detecção com base no formato do seu ensaio.

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