Anticorpo policlonal anti-alfa-galactosidase (GLA) para WB e ELISA - P06280

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da alfa-galactosidase A (GLA)

• O gene GLA codifica a alfa-galactosidase A, também denominada alfa-D-galactosidase A, galactosilgalactosilglucosilceramidase GLA e melibiase.
• A alfa-galactosidase A é uma enzima lisossomal que catalisa a hidrólise de glicoesfingolipídios, desempenhando um papel fundamental no metabolismo lipídico e na degradação lisossomal.
• Ela cliva especificamente resíduos terminais de alfa-galactose de substratos como o globotriaosilceramida (Gb3) e outros glicoconjugados.
• A enzima localiza-se no lisossomo, onde funciona de maneira ideal em pH ácido.
• Mutações no GLA estão associadas à doença de Fabry, um distúrbio de armazenamento lisossomal ligado ao cromossomo X, caracterizado pelo acúmulo de glicoesfingolipídios (palavra-chave: variante da doença).
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N e formação de pontes dissulfeto, importantes para a estabilidade e a atividade enzimática (palavras-chave: glicoproteína, ponte dissulfeto).
• A proteína é sintetizada com um peptídeo-sinal que a direciona ao retículo endoplasmático para processamento subsequente e tráfego até o lisossomo.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 150–429 da GLA humana, abrangendo a maior parte do domínio catalítico; este anticorpo pode reconhecer tanto as formas maduras quanto as desnaturadas e é adequado para WB e ELISA.
• Para Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 49 kDa (forma glicosilada); a preparação adequada do lisado e as condições redutoras podem ser importantes.
• Para ELISA, considere utilizar a proteína GLA recombinante ou extratos celulares como padrões/antígenos e valide a detecção no formato específico do seu ensaio.
• Devido à localização lisossomal, o fracionamento celular ou tecidual pode auxiliar no enriquecimento do sinal.
• A reatividade cruzada com outras espécies não foi testada extensivamente; recomenda-se validação ao utilizar amostras não humanas.

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