Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Galactosidase Alpha (GLA) para WB, IF/ICC, ELISA - P06280

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Galactosidase alpha (GLA)

• A alfa-galactosidase A (GLA), também conhecida como melibiase, é uma glicosidase lisossomal que catalisa a hidrólise de porções terminais alfa-galactosil de glicoproteínas e glicolipídios.
• Seu substrato principal no lisossomo é a globotriaosilceramida (Gb3), e sua atividade é fundamental para a degradação gradual das glicoesfingolipídios.
• A enzima é codificada pelo gene GLA; mutações levam ao acúmulo de glicoesfingolipídios, uma característica marcante das doenças de armazenamento lisossomal.
• A GLA é uma glicoproteína que forma um homodímero; o peptídeo maduro tem peso molecular previsto de aproximadamente 48,8 kDa, mas frequentemente migra ao redor de 49–51 kDa em SDS-PAGE devido à glicosilação.
• A localização subcelular é predominantemente lisossomal, o que é consistente com sua função no sistema endolisossomal.
• As modificações pós-tradução incluem glicosilação ligada a N e pontes dissulfeto intramoleculares, ambas importantes para a atividade enzimática e a estabilidade da proteína.
• De acordo com a UniProt, a GLA é uma proteína associada a doenças com inúmeras variantes patogênicas relatadas, e está sujeita à edição de RNA.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 150–429, que cobrem uma região grande e conservada da enzima; portanto, o anticorpo pode ser adequado para detectar tanto a proteína nativa quanto a desnaturada.
• Para o western blotting (WB), espera-se uma banda próxima de 49–51 kDa, embora a glicosilação e a preparação da amostra possam influenciar a migração. Considere usar controles positivos, como linhagens celulares humanas ou murinas conhecidas por expressarem GLA.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), valide o anticorpo em células com expressão moderada a alta de GLA, e considere a marcação dupla com um marcador lisossomal (por exemplo, LAMP1) para confirmar a localização.
• De acordo com os dados do fornecedor, o anticorpo reage de forma cruzada com a GLA de camundongo; portanto, tecidos murinos como fígado, rim ou coração podem servir como sistemas modelo.
• Aplicações de ELISA podem exigir otimização do antígeno de revestimento e do formato de detecção; usar a proteína GLA recombinante como padrão pode ajudar na quantificação.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Integrado

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