Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-GATA3 para WB, IF, FC - P23771

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GATA-3

• GATA3 (fator de ligação GATA 3) é um membro da família de fatores de transcrição dedo de zinco GATA que se liga à sequência de DNA de consenso 5'-AGATAG-3' nas regiões reguladoras dos genes alvo.
• Atua como um ativador transcricional crítico para a expressão dos genes do receptor de células T α e δ, e é essencial para a diferenciação de células T auxiliares 2 (Th2), impulsionando respostas imunes e inflamatórias.
• O GATA3 aumenta a expressão de ASB2 por similaridade e coordena a ativação transcricional de macrófagos dependente de IL33 e o reprogramamento metabólico mediado por UCP2, promovendo a ativação alternativa de macrófagos durante lesões teciduais.
• A proteína localiza-se exclusivamente no núcleo, consistente com o seu papel como fator de transcrição.
• É predominantemente expresso em células T e células endoteliais, e mutações no GATA3 causam hipoparatireoidismo, surdez neurosensorial e doença renal (síndrome HDR) – refletido nos apelidos HDR/HDRS.
• O GATA3 sofre fosforilação pós-traducional e contém dois domínios de dedo de zinco do tipo C2H2 que medeiam a ligação ao DNA.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a proteína é sujeita a identificação por proteômica em vários estudos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 1–200 do GATA3 humano, uma região N-terminal que inclui domínios reguladores; portanto, o anticorpo pode reconhecer múltiplas isoformas e estados de fosforilação. Confirme por western blot usando lisados de células expressando GATA3.
• Para western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 48 kDa; use um controle de carregamento adequado e valide a especificidade do sinal via knockdown de siRNA ou linhagens de células knockout.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica e citometria de fluxo (intracelular), deve ser observada coloração nuclear. Permeabilize as células adequadamente e inclua controles de isotipo.
• O anticorpo é específico para GATA3 humano; a reatividade cruzada com camundongo ou rato não foi determinada. Valide em sistemas de modelo relevantes se for pretendido o uso entre espécies.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser empregado em formatos sanduíche ou direto; otimize as condições de revestimento e detecção.

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