Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-GCDH para WB, IHC-P, ELISA - Q92947

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GCDH

• A proteína GCDH (glutaril-CoA desidrogenase), também conhecida como GCD ou ACAD5, catalisa a descarboxilação oxidativa da glutaril-CoA em crotonil-CoA e CO₂ na matriz mitocondrial. Essa reação é uma etapa fundamental na degradação da L-lisina, L-hidroxi-lisina e L-triptofano.
• Como membro da família das acil-CoA desidrogenases, a GCDH utiliza a flavoproteína de transferência de elétrons (ETF) como acceptor de elétrons, e sua atividade é essencial para o catabolismo adequado de aminoácidos.
• A isoforma curta da GCDH, gerada por splicing alternativo, é cataliticamente inativa, indicando complexidade regulatória. Tanto a isoforma longa quanto a curta são expressas em fibroblastos e fígado.
• A GCDH se localiza na matriz mitocondrial, o que é consistente com seu papel nas vias de oxidação de ácidos graxos e aminoácidos.
• A proteína é uma flavoproteína que liga FAD como cofator, e sua deficiência causa a acidúria glutárica tipo I, uma doença metabólica grave caracterizada por danos neurológicos e acúmulo de ácidos orgânicos.
• As modificações pós-traducionais incluem a acetilação, que pode modular sua atividade ou estabilidade.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 149-438 da GCDH humana (NP_000150.1). Essa região cobre parte do domínio catalítico, sendo provável a geração de anticorpos que reconhecem tanto a isoforma longa quanto a curta, se o epítopo estiver presente em ambas.
• Para Western blotting, é esperada uma banda em torno de 48 kDa com base no peso molecular previsto; no entanto, a mobilidade observada pode variar devido a modificações pós-traducionais ou diferenças entre isoformas. Valide o peso molecular com controles conhecidos no seu sistema de amostras.
• O anticorpo tem reatividade descrita para amostras humanas, de camundongo e rato. Para outras espécies, a homologia de sequência deve ser verificada antes do uso, e a reatividade cruzada deve ser confirmada experimentalmente.
• Ao realizar IHC-P, as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato pH 6,0 ou tampão EDTA pH 9,0) e as diluições do anticorpo devem ser otimizadas para o tipo de tecido e o método de fixação estudados.
• Como anticorpo policlonal, deve-se considerar a potencial variabilidade entre lotes; cada novo lote pode exigir uma reotimização das condições do ensaio.

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