Anticorpo Monoclonal Anti-GCLC para WB, IF/ICC, ELISA - P48506

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GCLC

• GCLC, também conhecida como cadeia pesada da GCS, gamma-ECS ou gamma-glutamilcisteína sintetase, é a subunidade catalítica da glutamato-cisteína ligase (GCL).
• Catalisa a ligação dependente de ATP de L-glutamato e L-cisteína, o primeiro e limitante passo na biossíntese da glutationa (GSH), uma via antioxidante crítica.
• Juntamente com a subunidade regulatória GCLM, a GCLC forma a holoenzima GCL heterodimérica, essencial para manter a homeostase redox celular.
• Palavras-chave indicam que a GCLC está sujeita a acetilação e fosforilação, sugerindo regulação por modificações pós-traducionais.
• Mutações na GCLC estão associadas à anemia hemolítica hereditária devido à deficiência de glutationa, destacando sua relevância clínica.
• A GCLC contém um domínio de ligação ao ATP, consistente com seu papel como uma ligase que usa ATP para a síntese de glutationa.
• É um membro do proteoma de referência e foi identificada em múltiplos estudos de proteômica, confirmando sua expressão ubíqua.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região N-terminal (aminoácidos 1-135) da GCLC humana, uma região que pode ser conservada entre espécies, consistente com a reatividade cruzada observada com camundongo.
• Para western blot (WB), considere otimizar a diluição do anticorpo primário e valide com lisados de controle positivo e negativo que expressem GCLC.
• Em imunofluorescência / imunocitoquímica (IF/ICC), garanta métodos de fixação e permeabilização adequados para o seu tipo celular; a inclusão de controles de isotipo é recomendada.
• Para ELISA, teste contra GCLC recombinante ou proteína nativa em lisados celulares/de tecido; uma titulação em grade pode ajudar a determinar as concentrações ótimas de anticorpo e antígeno.
• Dada a reatividade cruzada com camundongo, este anticorpo pode ser adequado para estudos translacionais em modelos de roedores; a validação na espécie relevante é aconselhada.
• Sempre inclua controles apropriados (por exemplo, amostras knockout ou knockdown por siRNA) para confirmar a especificidade em seu sistema experimental.

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