Anticorpo policlonal de coelho anti-GCN1L1 (GCN1) para WB e ELISA - Q92616

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da GCN1L1 (GCN1)

• GCN1L1, também conhecida como GCN1, proteína 1 semelhante à GCN1 ou ativador translacional GCN1, é uma proteína grande, de aproximadamente 293 kDa, que funciona como sensor de ribossomos paralisados.
• Ela se liga diretamente aos ribossomos e atua como sentinela de ribossomos em colisão. Quando ocorre a paralisação ribossômica, a GCN1 promove o recrutamento da ligase E3 de ubiquitina RNF14, que ubiquitina EEF1A1/eEF1A e outros fatores de tradução, direcionando-os para degradação. Referências relacionadas: PMID:32610081, PMID:36638793, PMID:37651229, PMID:37951215, PMID:37951216
• A GCN1 também medeia a degradação de ETF1/eRF1 e a ubiquitinação de proteínas ribossômicas por meio da via RNF14-RNF25, assegurando a remoção dos complexos de tradução paralisados. Referências relacionadas: PMID:36638793, PMID:37651229
• Como ativador positivo da resposta integrada ao estresse (ISR), a GCN1 interage com a quinase EIF2AK4/GCN2 nos ribossomos em tradução, estimulando sua atividade. Isso leva à fosforilação de eIF-2-alfa e à atenuação global da tradução, ao mesmo tempo que permite a tradução seletiva de mRNAs responsivos ao estresse, como ATF4.
• A GCN1 está localizada principalmente no citoplasma, onde monitora os ribossomos em tradução.
• É expressa ubiquamente, com expressão notável no músculo esquelético, ovário e testículo. Referências relacionadas: PMID:9039502, PMID:9234705
• A proteína sofre acetilação e fosforilação e apresenta domínios de hélice-hélice enrolada e repetições, de acordo com seu grande papel estrutural.
• As palavras-chave do UniProt também incluem Resposta ao estresse, Regulação da tradução e Ativador, destacando seu papel central na proteostase celular.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região C-terminal (aa 2462–2671), que pode proporcionar especificidade para a GCN1L1 de comprimento completo. Considere verificar a reatividade do anticorpo utilizando lisados de linhagens celulares humanas com expressão conhecida de GCN1L1.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 293 kDa; utilize uma porcentagem de gel e condições de transferência adequadas para proteínas de alto peso molecular.
• O ELISA pode ser utilizado para detectar e quantificar GCN1L1 em amostras humanas; considere combiná-lo com um anticorpo de detecção compatível para ELISA sanduíche.
• Como a GCN1L1 é expressa ubiquamente, ela pode servir como controle de carregamento para proteínas de alto peso molecular; no entanto, valide a estabilidade da expressão em diferentes condições experimentais.
• A reatividade cruzada foi relatada apenas para humanos; para outras espécies, realize um alinhamento de sequência para avaliar a possível reatividade.
• O envio em bolsas de gelo sugere que o anticorpo é estável sob cadeia fria; armazene-o na temperatura recomendada após o recebimento.

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