Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-GCN2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9P2K8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de GCN2

• GCN2, codificado por EIF2AK4, é uma quinase serina/treonina sensora de estresse metabólico que fosforila eIF-2-alfa em resposta à baixa disponibilidade de aminoácidos, ativando a resposta integrada ao estresse (ISR). Referências relacionadas: PMID:25329545 PMID:32610081
• A fosforilação de eIF-2-alfa o converte em um inibidor global da tradução, atenuando a síntese proteica dependente de capina, enquanto permite a tradução seletiva de mRNAs específicos da ISR, como ATF4, reprogramando assim a expressão gênica da biossíntese de aminoácidos. Referências relacionadas: PMID:32610081
• A proteína está envolvida na regulação do ciclo celular, promovendo a repressão da tradução do mRNA da ciclina D1 após a ativação da UPR ou a ativação da tradução de CDKN1A/p21 sob privação de aminoácidos. Referências relacionadas: PMID:26102367
• GCN2 contém um domínio de ligação a ATP, um domínio quinase e um domínio de ligação a tRNA, permitindo que ele detecte diretamente tRNAs não carregados e ligue o estado nutricional ao controle da tradução.
• Ele se localiza principalmente no citoplasma e é amplamente expresso, com presença notável no pulmão, células do músculo liso e macrófagos.
• A quinase desempenha um papel pró-sobrevivência e pró-apoptótico dependendo do contexto de estresse, e também está envolvida na defesa antiviral, promovendo a autofagia e a apresentação de antígenos durante a infecção pelo vírus da febre amarela. Referências relacionadas: PMID:24310610
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a proteína está sujeita a modificações pós-traducionais incluindo acetilação e fosforilação, que regulam sua atividade.
• Além da detecção de nutrientes, GCN2 contribui para a plasticidade sináptica, aprendizagem, formação de memória de longo prazo e inibição do crescimento de neuritos em contextos neuronais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para WB, considere o uso de um gel de SDS-PAGE de baixa porcentagem (ex: 6–8%) para resolver a proteína GCN2 de alto peso molecular (~187 kDa) e otimizar as condições de transferência para proteínas grandes.
• Em IF/ICC, espera-se coloração predominantemente citoplasmática; valide a localização subcelular com marcadores de organelas no seu sistema celular de interesse.
• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1–300); verifique a especificidade nas espécies relevantes (humano, camundongo, rato) usando controles positivos e negativos.
• Utilize controles de carga apropriados e considere o uso de inibidores de protease/fosfatase durante a lise, devido a possíveis modificações pós-traducionais que afetam a migração da proteína.

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