Anticorpo Policlonal Anti-Gephyrin para WB e ELISA - Q9NQX3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Gephyrin

• Gephyrin é uma proteína multifuncional conhecida principalmente como uma proteína associada a microtúbulos que ancora os receptores de neurotransmissores inibitórios ao citoesqueleto em locais pós-sinápticos.
• Atua como uma molécula instrutiva principal nas sinapses inibitórias, agrupando tanto os receptores de glicina (GLYR) quanto os receptores do tipo A do GABA, estabilizando assim a arquitetura sináptica. Referências relacionadas: PMID:25025157, PMID:26613940
• Além de seu papel estrutural, a gephirina catalisa duas etapas na biossíntese do cofator de molibdênio (MoCo), envolvendo a adenilação da molibdopterina seguida pela inserção de molibdato e liberação de AMP.
• O gene GPHN codifica várias isoformas através de splicing alternativo, contribuindo para a diversidade funcional em tecidos neuronais e não neuronais.
• Subcelularmente, a gephirina localiza-se na membrana celular pós-sináptica, dendritos e densidade pós-sináptica em neurônios, mas também é encontrada no citoplasma, citossol e associada ao citoesqueleto em outros tipos de células.
• Modificações pós-traducionais incluem palmitoililação e fosforilação, que regulam sua associação à membrana e atividade de agrupamento.
• Mutações associadas a doenças no GPHN foram ligadas a distúrbios neurológicos, enfatizando seu papel crítico na função sináptica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região terminal C (aa 520–769) da gephirina humana, que abrange sequências envolvidas no agrupamento de receptores; portanto, este anticorpo pode detectar isoformas que contêm este domínio.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 80 kDa; no entanto, o splicing alternativo e as modificações pós-traducionais podem resultar em bandas adicionais. Valide a especificidade usando controles apropriados (por exemplo, lisados de knockdown ou knockout).
• O anticorpo reage cruzadamente com a gephirina de camundongo e rato; considere o alinhamento de sequência da região do imunógeno para confirmar a homologia para outras espécies antes do uso.
• Este anticorpo policlonal é adequado para ELISA; recomenda-se a otimização padrão da concentração do antígeno de revestimento e das condições de detecção.
• Para aplicações de imuno-histoquímica (não validadas nas aplicações do produto), métodos de recuperação de antígeno podem ser necessários devido à localização sináptica restrita; realize experimentos piloto.

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