Anticorpo Monoclonal Anti-GFAP para WB, IF, IHC-P, ELISA - P14136

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GFAP

• A GFAP (proteína ácida fibrilar glial) é uma proteína de filamento intermediário classe III e um marcador bem estabelecido para astrócitos no sistema nervoso central.
• Ela desempenha um papel crítico na distinção entre astrócitos e outras células gliais durante o desenvolvimento do SNC (UniProt).
• A proteína se localiza predominantemente no citoplasma, formando redes filamentosas.
• A GFAP exibe expressão tecido-específica em células que não apresentam fibronectina, o que é consistente com sua especificidade por células gliais.
• As modificações pós-traducionais incluem citrulinação, metilação e fosforilação, que podem regular a dinâmica e a função dos filamentos.
• O gene GFAP sofre splicing alternativo, originando múltiplas isoformas com potencial diversidade funcional.
• Mutações no gene GFAP estão associadas à doença de Alexander, uma leucodistrofia, destacando sua importância para a integridade dos astrócitos.
• Palavras-chave do UniProt incluem: estrutura 3D, bobina enrolada, sequenciamento direto de proteínas, identificação proteômica, proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado para gerar este anticorpo corresponde aos aminoácidos 60-383 da GFAP humana, cobrindo uma grande região interna da proteína. Este desenho pode permitir o reconhecimento de múltiplas isoformas de GFAP e a reatividade cruzada entre espécies, conforme validado para camundongo e rato.
• Para Western blotting (WB), a banda observada deve estar em torno de 50 kDa (peso molecular teórico ~49,9 kDa). Recomenda-se o uso de lisados de células totais de tecido cerebral ou astrócitos cultivados.
• Para imunofluorescência (IF/ICC, IF-P) e imunohistoquímica (IHC-P), as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para preservar a estrutura dos filamentos intermediários. A coloração para GFAP deve produzir um padrão citoplasmático filamento típico em astrócitos.
• Em aplicações de ELISA, este anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; o pareamento com um anticorpo compatível adequado pode melhorar a sensibilidade.
• Dada a natureza monoclonal, é esperada consistência entre lotes, mas a validação no modelo experimental específico é recomendada.

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