Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-GFRA3 para WB e ELISA - O60609

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GFRA3

• GFRA3 (receptor alfa-3 da família GDNF) é um receptor de superfície celular ancorado por glicosilfosfatidilinositol (GPI) que pertence à família de receptores GDNF.
• Ele funciona como um receptor de alta afinidade para a artemina (ARTN), um fator neurotrófico que suporta a sobrevivência de neurônios periféricos sensoriais e simpáticos. Referências relacionadas: PMID:31535977 PMID:9883723
• Após a ligação da artemina, a GFRA3 forma um complexo com a receptor tirosina quinase RET, levando à autofosforilação e ativação das vias de sinalização downstream mediadas por RET.
• O receptor está ancorado à folheta externa da membrana celular por meio de uma ligação GPI e contém um peptídeo sinal, múltiplas pontes dissulfeto e sítios de glicosilação N-ligada.
• A GFRA3 é amplamente expressa em tecidos adultos e fetais, com níveis particularmente elevados no sistema nervoso periférico (gânglios sensoriais e simpáticos), estômago e apêndice; sua expressão está ausente no sistema nervoso central.
• O splicing alternativo do gene GFRA3 pode dar origem a múltiplas isoformas, e a proteína está sujeita a desprendimento proteolítico da membrana.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 32–240 da GFRA3 humana, que abrange o domínio de ligação do ligante extracelular; esse projeto favorece a detecção das formas ligadas à membrana ou desprendidas.
• Para Western blotting, use tampões de lise apropriados contendo detergentes e inibidores de protease; o peso molecular previsto é de ~45 kDa, mas a glicosilação pode causar um desvio para massas aparentes mais altas.
• No ELISA, considere a cobertura com o domínio extracelular da GFRA3 recombinante ou artemina para capturar o anticorpo; confirme a reatividade contra a proteína nativa em matrizes biológicas.
• Dada a natureza policlonal, a potencial reatividade cruzada com outros receptores da família GDNF (por exemplo, GFRA1, GFRA2) deve ser avaliada usando controles knockout ou peptídeos de bloqueio.
• A reatividade cruzada relatada com a GFRA3 de camundongo permite estudos comparativos entre espécies; valide o desempenho no tipo de amostra relevante antes de comparações quantitativas.

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