Anticorpo Policlonal de Coelho anti-GIF para WB, ELISA - P27352

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GIF

• A proteína codificada pelo gene CBLIF (GIF) é o fator intrínseco gástrico (IF), também conhecido como fator intrínseco de ligação à cobalamina, essencial para a absorção da vitamina B12 (cobalamina).
• O GIF é uma glicoproteína secretada pelas células da mucosa gástrica, predominantemente pelas células parietais, e é produzida como um precursor com peptídeo sinal.
• Funcionalmente, o GIF se liga à cobalamina livre no estômago; após clivagem proteolítica no duodeno, o complexo estável GIF-cobalamina interage com o receptor cubilina (CUBN) no íleo, facilitando a endocitose mediada por receptor para a captação da vitamina B12.
• O gene GIF sofre splicing alternativo, gerando múltiplas isoformas; variantes associadas a doenças no CBLIF causam deficiência de fator intrínseco (DFI), levando à anemia perniciosa devido à absorção prejudicada de B12.
• O GIF é uma fosfoproteína com múltiplas pontes dissulfeto essenciais para sua estrutura e função, e pertence a um grupo de proteínas envolvidas no transporte de cobalto e íons.
• A expressão tecidual é altamente específica da mucosa gástrica, consistente com seu papel na absorção gastrointestinal de vitaminas.
• Palavras-chave associadas a esta proteína incluem variante de doença, glicoproteína, secretada, sinal e transporte, destacando sua importância clínica e funcional.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 19-417 do GIF humano, correspondente à proteína madura sem o peptídeo sinal, o que indica que o anticorpo pode reconhecer a forma secretada endógena.
• Para Western blot, considere comparar condições de SDS-PAGE redutor e não redutor, pois o GIF contém múltiplas pontes dissulfeto que podem influenciar a mobilidade eletroforética.
• Dada a expressão tecidual específica na mucosa gástrica, valide o anticorpo em lisados de estômago de humano, camundongo ou rato, e considere usar um tecido negativo como o fígado para controle de especificidade.
• No ELISA, este anticorpo policlonal pode ser testado como reagente de captura ou detecção; para ELISA sanduíche, recomenda-se o pareamento com um anticorpo monoclonal anti-GIF para aumentar a especificidade.
• Como o GIF é uma proteína secretada, ao analisar sobrenadantes de cultura celular ou tecidual, etapas de concentração podem ser necessárias para detectar níveis endógenos por WB ou ELISA.
• Como a reatividade cruzada é reportada para camundongo e rato, verifique a conservação do epítopo e o desempenho do ensaio nessas espécies usando controles positivos apropriados.

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