Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-GIF/Fator Intrínseco para WB, IF/ICC, ELISA - P27352

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GIF (Fator Intrínseco)

• O GIF codifica o fator intrínseco ligante de cobalamina, também conhecido como fator intrínseco gástrico (IF) ou INF. É uma glicoproteína secretada com peso molecular de aproximadamente 45 kDa (UniProt: 45.416 Da).
• Sua função primária é promover a absorção da vitamina B12 (cobalamina) no íleo, formando um complexo com a cobalamina e interagindo com o receptor cubilina (CUBN) para endocitose mediada por receptor.
• A expressão é altamente específica da mucosa gástrica, onde é secretada pelas células parietais.
• A proteína contém características como peptídeo sinal, ligações dissulfeto e sítios de glicosilação, e sofre processamento alternativo e fosforilação (palavras-chave UniProt).
• Pertence à família de transporte de cobalamina e está envolvido no transporte de íons cobalto. Mutações no GIF estão associadas à deficiência congênita de fator intrínseco, uma forma rara de anemia megaloblástica.
• Estudos estruturais tridimensionais foram relatados (palavra-chave UniProt: estrutura-3D).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 20–300 do GIF humano, cobrindo a região N-terminal incluindo o sítio de clivagem do peptídeo sinal e o domínio de ligação à cobalamina. Esta região é relativamente conservada, suportando a reatividade cruzada com camundongo (conforme indicado).
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda em torno de 45 kDa em lisados de tecido gástrico ou linhas celulares que expressam GIF. Valide o anticorpo no sistema de amostra apropriado, pois a secreção pode levar a baixos níveis intracelulares.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), considere a permeabilização para detectar pools de proteína intracelular durante a síntese. Para detecção de proteína secretada, a inclusão de um inibidor de secreção (por exemplo, brefeldina A) pode melhorar o sinal.
• Em aplicações de ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado como reagente de captura ou detecção; no entanto, o emparelhamento com um anticorpo monoclonal pode melhorar a especificidade em formatos de ELISA sanduíche.
• Sempre inclua controles positivos (extrato de mucosa gástrica) e negativos (tecido não expressor) apropriados, e valide o desempenho do anticorpo no seu contexto experimental.

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