Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-GJB1 para WB e ELISA - P08034

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de GJB1 / Conexina-32

• GJB1 codifica a proteína beta-1 da junção comunicante, também conhecida como Conexina-32 (Cx32) ou proteína hepática de 28 kDa da junção comunicante, membro da família das proteínas conexinas das junções comunicantes.
• A Conexina-32 forma hemicanais hexaméricos (conexons) que se acoplam entre células adjacentes para criar junções comunicantes, permitindo a difusão intercelular direta de íons e pequenas moléculas < 1 kDa.
• Está localizada principalmente na membrana celular e enriquecida nas placas de junções comunicantes, facilitando o acoplamento elétrico e metabólico em tecidos como fígado, nervos periféricos e células de Schwann.
• A proteína possui quatro domínios transmembrana, com as extremidades N- e C-terminais localizadas intracelularmente; o imunógeno corresponde ao domínio citoplasmático C-terminal (resíduos 214–283).
• GJB1 é uma fosfoproteína; a fosforilação pós-traducional regula a abertura dos canais, a montagem e a degradação.
• Mutações em GJB1 estão associadas à doença de Charcot-Marie-Tooth ligada ao X (CMTX1) e à síndrome de Dejerine-Sottas, neuropatias periféricas hereditárias caracterizadas por fraqueza muscular progressiva e perda sensorial.
• O peso molecular previsto é de aproximadamente 32 kDa, consistente com a banda de 32 kDa frequentemente observada em Western blotting sob condições redutoras.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 214–283) do GJB1 humano, que é prevista como intracelular; portanto, o anticorpo pode reconhecer tanto a proteína total quanto a não modificada, mas recomenda-se a confirmação.
• Para Western blotting, considere utilizar amostras reduzidas e validar o anticorpo em tecidos que expressam GJB1 (por exemplo, fígado e nervo ciático) ou em linhagens celulares; espera-se uma banda próxima de 32 kDa.
• Como o anticorpo apresenta reação cruzada com camundongo e rato, ele é adequado para estudos com múltiplas espécies; entretanto, verifique a reatividade cruzada em seu modelo experimental específico.
• Para ELISA, utilize proteína GJB1 recombinante ou purificada como padrão; otimize empiricamente o tampão de revestimento e a diluição do anticorpo, pois não é fornecido nenhum título predefinido.
• Este anticorpo policlonal pode apresentar variação entre lotes, característica típica de preparações policlonais; recomendamos incluir controles apropriados e considerar a validação específica de cada lote.

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