Anticorpo monoclonal de coelho anti-GLUD1/2 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P00367/P49448

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da GLUD1/2

• A GLUD1 (glutamato desidrogenase 1) é uma enzima da matriz mitocondrial que catalisa a desaminação oxidativa reversível do L-glutamato em alfa-cetoglutarato e amônia, utilizando NAD(P)+ como cofator.
• Ela desempenha um papel fundamental na anaplerose da glutamina, produzindo alfa-cetoglutarato para repor os intermediários do ciclo do ácido tricarboxílico. Referências relacionadas: PMID:11032875 PMID:11254391 PMID:16023112
• A enzima está envolvida na homeostase da insulina, regulando a secreção de insulina estimulada pela glicose nas células beta pancreáticas. Referências relacionadas: PMID:11297618 PMID:9571255
• Ela pode modular a renovação do neurotransmissor excitatório glutamato, influenciando potencialmente os processos de aprendizagem e memória.
• A GLUD1 localiza-se principalmente na matriz mitocondrial e também foi detectada no retículo endoplasmático.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, ADP-ribosilação e fosforilação, que regulam sua atividade.
• Este anticorpo tem como alvo tanto a GLUD1 quanto sua isoforma GLUD2 (também conhecida como GDH2), devido à alta homologia de sequência entre as duas proteínas; a GLUD2 é expressa predominantemente nos tecidos neural e testicular.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Este anticorpo monoclonal de coelho foi produzido contra uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 319–558 da GLUD1/2 humana, uma região conservada em ambas as isoformas. Espera-se que detecte tanto a GLUD1 quanto a GLUD2 endógenas.
• Na análise por Western blot, deve ser observada uma banda de aproximadamente 61 kDa em lisados de amostras humanas, de camundongo e de rato. Utilize controles positivos apropriados, como extratos de tecido hepático ou cerebral.
• Na imunocoloração (IF/ICC, IHC-P), é esperada uma localização mitocondrial. Um padrão pontilhado perinuclear pode ser visível; a contracoloração com um marcador mitocondrial pode ajudar a confirmar a especificidade.
• O anticorpo é aplicável a WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P e ELISA. As concentrações de trabalho e as condições ideais devem ser determinadas empiricamente para cada ensaio e tipo de amostra.
• Devido à alta similaridade entre GLUD1 e GLUD2, espera-se reatividade cruzada com ambos os alvos; isso deve ser considerado ao interpretar os resultados em tecidos nos quais ambas as isoformas são expressas.

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