Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-GM130 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q08379

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GM130

• GM130 (membro 2 da subfamília A da Golgin) é uma proteína periférica de membrana da pilha do cis-Golgi, que atua como esqueleto de membrana que mantém a estrutura do Golgi e facilita a ancoragem de vesículas (Provável) (PubMed:16489344). Referências relacionadas: PMID:16489344
• Junto com p115/USO1 e STX5, medeia a ancoragem e fusão de vesículas na membrana do cis-Golgi para manter a estrutura empilhada e interligada do aparelho de Golgi.
• A GM130 é essencial para a desmontagem mitótica do Golgi: a fosforilação na Ser-37 pela CDK1 no início da mitose inibe a interação com p115, impedindo a ancoragem de vesículas COPI e interrompendo o transporte.
• Ela desempenha um papel fundamental na montagem do polo fusório e na organização do centrossomo (PubMed:26165940). A GM130 promove a montagem do polo fusório recrutando TPX2 para as membranas do Golgi, o que ativa a quinase AURKA e estimula a nucleação local de microtúbulos, ligando assim as membranas do Golgi ao fuso mitótico (PubMed:19242490, PubMed:26165940). Referências relacionadas: PMID:26165940 PMID:19242490
• Ela também regula a organização do centrossoma independentemente de seu papel na estrutura do Golgi (PubMed:18045989, PubMed:19109421). Referências relacionadas: PMID:18045989 PMID:19109421
• A GM130 é necessária para a formação da faixa do Golgi e a glicosilação correta de proteínas de membrana e secretoras (PubMed:16489344, PubMed:17314401). Referências relacionadas: PMID:16489344 PMID:17314401
• Subcelularmente, a GM130 se localiza na membrana da rede do cis-Golgi, na membrana do compartimento intermediário ER-Golgi e na região do polo fusório do citoesqueleto.
• A GM130 possui domínios de enrolamento duplo e sofre fosforilação e metilação; mutações no gene GOLGA2 estão associadas a deficiência intelectual.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 20–300 da GM130 humana) compreende a região N-terminal de enrolamento duplo envolvida na ligação de p115; leve isso em consideração ao interpretar os padrões de bandas ou o reconhecimento potencial de isoformas no Western blot.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~113 kDa; utilize uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, SDS-PAGE 6–8%) e protocolos de transferência eficientes para proteínas de alto peso molecular.
• Nas aplicações de IHC-P e IF/ICC, otimize as etapas de recuperação de antígeno e permeabilização para garantir a acessibilidade ao alvo localizado no cis-Golgi; valide em seu tecido ou sistema celular específico.
• Ao usar o ELISA, avalie a adequação do anticorpo como reagente de captura ou detecção; a reatividade cruzada com a GM130 de camundongo e rato pode ser vantajosa para estudos multiespécies.
• Como anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada para ensaios quantitativos críticos, e controles apropriados são recomendados para confirmar a especificidade.

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