Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-GNAT3 para WB, IF/ICC, ELISA - A8MTJ3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GNAT3

• A subunidade alfa-3 da proteína de ligação a nucleotídeos de guanina G(t), também conhecida como cadeia alfa-3 da gustducina, é codificada pelo gene GNAT3 e pertence à família de subunidades alfa de proteínas G heterotriméricas.
• Desempenha um papel proeminente na transdução do paladar amargo, doce e umami, acoplando receptores de paladar específicos na superfície celular a uma fosfodiesterase de cGMP, levando a uma diminuição nos níveis intracelulares de cAMP e cGMP e ao subsequente influxo de cálcio. Referências relacionadas: PMID:38600377 PMID:38776963
• O heterotrímero de gustducina medeia respostas a compostos amargos e doces: a subunidade alfa regula a atividade da fosfodiesterase, enquanto as subunidades beta/gama ativam a fosfolipase C, resultando em aumento de inositol trifosfato e cálcio intracelular.
• O GNAT3 acopla-se funcionalmente a heterodímeros de receptores de paladar: TAS1R2/TAS1R3 para sensação doce e TAS1R1/TAS1R3 para paladar umami, bem como a receptores amargos da família T2R, como o TAS2R14. Referências relacionadas: PMID:38600377 PMID:38776963
• No trato gastrointestinal, o GNAT3 atua como um sensor de açúcar luminal em células enteroendócrinas, controlando a expressão do transportador de sódio-glicose SGLT1 e estimulando a secreção das hormonas incretinas GLP-1 e GIP, ligando assim a sinalização do paladar à regulação metabólica e à homeostase da glucose.
• A localização subcelular é citoplasmática, com expressão específica do tecido nas papilas gustativas circunvaladas e foliadas, células enteroendócrinas L do intestino e espermatozoides.
• O peso molecular anotado é de aproximadamente 40 kDa; as modificações pós-traducionais incluem miristoilação, que pode facilitar a associação à membrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 60–130 do GNAT3 (NP_001095856.1), uma região interna; o anticorpo policlonal resultante deve reconhecer tanto a proteína nativa quanto a desnaturada, sendo adequado para aplicações como WB, IF/ICC e ELISA.
• Para Western blotting, a banda prevista é de ~40 kDa; considere o uso de bloqueio apropriado e diluição do anticorpo primário com base nos níveis de expressão endógena em tecidos gustativos ou intestinais.
• Na imunofluorescência/ICC, otimize os protocolos de fixação e permeabilização, pois o GNAT3 é uma proteína citoplasmática; inclua controlos negativos apropriados e contracoloração.
• Ao realizar ELISA, note que os anticorpos policlonais podem fornecer um sinal mais elevado devido à ligação multi-epítopo; titule o anticorpo e use um sistema de deteção secundário compatível.
• Confirme a reatividade cruzada com amostras de camundongo e humano; valide o desempenho no seu tecido ou linhagem celular específico de interesse.

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