Anticorpo Policlonal Anti-GNRH1 para WB, IF/ICC, ELISA - P01148

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GNRH1

• A progonadoliberina-1 (GNRH1) é uma proteína precursora que é processada para produzir o hormônio liberador de gonadotrofina 1 (GnRH), um regulador chave do eixo reprodutivo.
• O GnRH estimula a hipófise anterior a secretar o hormônio luteinizante (LH) e o hormônio folículo-estimulante (FSH), que são essenciais para a função gonadal.
• A proteína é codificada pelo gene GNRH1, também conhecido como GNRH, GRH e LHRH, localizado no cromossomo 8.
• É sintetizada como uma pré-pró-proteína com um peptídeo sinal (aa 1-23), e o decapeptídeo maduro (aa 24-33) é liberado após clivagem proteolítica.
• Subcelularmente, o GNRH1 é direcionado para a via secretora e é secretado por neurônios hipotalâmicos.
• Modificações pós-traducionais incluem amidação da extremidade C-terminal, formação de ácido piroglutâmico na extremidade N-terminal e clivagem em resíduos básicos pareados.
• O peso molecular do precursor não processado é de aproximadamente 10,38 kDa, mas o processamento gera peptídeos ativos menores.
• Mutações no GNRH1 estão associadas a hipogonadismo hipogonadotrófico e síndrome de Kallmann, destacando sua importância clínica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado corresponde aos aminoácidos 24–92, que inclui o decapeptídeo GnRH maduro e sequências flanqueadoras; portanto, o anticorpo pode reconhecer tanto as formas precursoras quanto as processadas.
• Para Western blot, o peso molecular previsto do precursor de comprimento total é ~10 kDa; use um gel de alta porcentagem (ex.: 15%) e otimize as condições de transferência para reter os peptídeos pequenos.
• A detecção do peptídeo maduro secretado em WB pode exigir concentração do sobrenadante de cultura ou protocolos de extração de peptídeos.
• Em IF/ICC, o GNRH1 é secretado; considere usar inibidores do Golgi (ex.: brefeldina A) para visualizar o acúmulo intracelular em células neuroendócrinas.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; valide seu desempenho com padrões recombinantes de GnRH.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato sugere epítopos conservados; no entanto, sempre verifique a especificidade na espécie e tipo de tecido relevantes.

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