Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-GOT1 para WB, IF/ICC, ELISA - P17174

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GOT1

• A GOT1 é uma aspartato aminotransferase citoplasmática que também apresenta atividade de cisteína transaminase, comumente referida como cAST, SGOT ou cCAT. Ela pertence à família das aminotransferases dependentes de piridoxal fosfato de classe I.
• Ela catalisa a conversão reversível de L-aspartato e α-cetoglutarato em oxaloacetato e L-glutamato, desempenhando um papel chave na regulação dos níveis do principal neurotransmissor excitatório, o glutamato, no sistema nervoso central (PubMed:21900944). Referências relacionadas: PMID:21900944
• Através de sua atividade de cisteína transaminase, a GOT1 gera mercaptopiruvato, que é subsequentemente convertido em sulfeto de hidrogênio (H₂S) pela 3-mercaptopyruvo sulfurtransferase. O H₂S atua como um importante modulador sináptico e neuroprotetor no cérebro. Referências relacionadas: PMID:21900944
• A GOT1 catalisa adicionalmente a formação de (2S)-2-aminobutanoato, um subproduto da via de biossíntese da cisteína (PubMed:27827456). Referências relacionadas: PMID:27827456
• A enzima está envolvida na síntese hepática de glicose durante o desenvolvimento e contribui para a gliceroneogênese em adipócitos.
• A GOT1 está localizada no citoplasma, é conhecida por ser fosforilada; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas proteicas.
• Estudos estruturais definiram sua dobra tridimensional, e sua atividade depende do cofator piridoxal fosfato.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi desenvolvido contra um peptídeo sintético imunógeno localizado entre os aminoácidos 150–250 da GOT1 humana. Ao planejar experimentos, verifique a homologia de sequência se usar espécies não humanas, pois a reatividade cruzada com camundongo e rato já foi observada.
• Para Western blotting, é esperada uma banda de aproximadamente 46 kDa correspondente à GOT1. Considere otimizar a preparação da amostra e a diluição do anticorpo para o seu tipo específico de amostra.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica, a GOT1 deve se localizar predominantemente no citoplasma. Inclua etapas adequadas de fixação e permeabilização para garantir a acessibilidade do anticorpo.
• Para aplicações em ELISA, o anticorpo pode ser adequado como reagente de captura e detecção; no entanto, recomenda-se o pareamento com um anticorpo compatível, que deve ser validado no sistema de ensaio do usuário.
• Como qualquer anticorpo para uso em pesquisa, recomendamos titular o anticorpo nas suas condições experimentais exatas e incluir controles positivos e negativos adequados.

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