Anticorpo Policlonal Anti-GPD2 para WB, ELISA - P43304

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GPD2

• O GPD2 codifica a glicerol-3-fosfato desidrogenase mitocondrial (mGDH), uma flavoproteína oxirredutase que catalisa a oxidação do glicerol-3-fosfato a diidroxiacetona fosfato, alimentando elétrons para a cadeia de transporte de elétrons. É uma enzima responsiva ao cálcio crítica para a sensibilidade à glicose e secreção de insulina nas células beta pancreáticas.
• A proteína funciona como um componente chave do desvio do fosfato de glicerol, que transfere equivalentes de redução do NADH citosólico para a cadeia respiratória mitocondrial, ligando a glicólise à fosforilação oxidativa.
• O mGDH localiza-se na membrana interna mitocondrial e contém um peptídeo de trânsito para o direcionamento mitocondrial, juntamente com um domínio de ligação de dinucleotídeo de flavina adenina (FAD) essencial para a atividade enzimática.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, e a proteína liga cálcio e outros íons metálicos, que modulam sua função catalítica.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas; a isoforma canônica tem um peso molecular calculado de aproximadamente 81 kDa (80853 Da, UniProt P43304).
• Como membro da família das glicerol-3-fosfato desidrogenases, o GPD2 é central para o metabolismo lipídico e homeostase energética, com implicações em diabetes e distúrbios metabólicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 25–325 do GPD2 humano, cobrindo uma região a jusante do peptídeo de trânsito mitocondrial. Este design pode reconhecer preferencialmente a forma madura e processada da proteína.
• Para Western blot, o peso molecular previsto do GPD2 é de ~81 kDa. Considere o uso de lisados de células inteiras de tecidos pancreáticos, hepáticos ou musculares, ou de linhagens celulares relevantes como INS-1 ou HepG2, onde a expressão de mGDH é esperada.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é especificada; a validação nestas espécies é recomendada comparando amostras de tecidos ou controles de proteínas recombinantes para confirmar a detecção comparável.
• Em aplicações de ELISA, titule tanto o antígeno de revestimento (proteína recombinante ou lisado de tecido) quanto a concentração do anticorpo primário para otimizar a relação sinal-ruído. Inclua controles para efeitos de matriz.
• Como a atividade do GPD2 é dependente de cálcio, evite quelantes de cálcio em tampões de lise ou ensaio, a menos que seu efeito seja caracterizado experimentalmente.

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