Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-GPNMB para WB e ELISA - Q14956

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GPNMB

• A GPNMB (Glicoproteína transmembranar NMB), também conhecida como fator de crescimento hematopoiético inducível tipo neurocinina-1 (HGFIN), é uma proteína transmembranar do tipo I codificada pelo gene GPNMB em humanos.
• Ela é prevista para funcionar como uma enzima melanogênica, potencialmente envolvida na biossíntese de melanina, embora sua atividade catalítica ainda não esteja totalmente definida.
• A proteína se localiza principalmente na membrana celular e nas membranas intracelulares dos melanosomos e endossomos precoces.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N e fosforilação, conforme indicado pela identificação proteômica.
• A GPNMB é amplamente expressa, com níveis baixos no cérebro. Ela é detectada em células mononucleares do sangue periférico, macrófagos teciduais (por exemplo, células de Kupffer, macrófagos alveolares), podócitos e no corpo ciliar do olho. Referências relacionadas: PMID:12609765 PMID:16609006 PMID:16489096
• Na pele, a GPNMB é expressa em níveis mais altos nos melanócitos, em comparação com queratinócitos e células de Langerhans. Referências relacionadas: PMID:29336782
• A superexpressão da GPNMB foi relatada em vários cânceres, incluindo melanoma e glioblastoma multiforme, sugerindo um papel na progressão tumoral. Referências relacionadas: PMID:16489096 PMID:16609006 PMID:7814155
• Variantes genéticas e splicing alternativo foram associados à amiloidose.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre o domínio extracelular (aa 23–486) da GPNMB humana; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça a proteína de comprimento completo em condições desnaturantes.
• Para western blot, uma banda migrando em aproximadamente 64 kDa deve ser observada. Recomenda-se o uso de lisados de linhagens celulares que expressam GPNMB (por exemplo, melanoma) como controle positivo.
• Os níveis endógenos de GPNMB em macrófagos ou outros tecidos podem ser baixos; considere estratégias de enriquecimento ou tempos de exposição prolongados.
• Para ELISA, o pareamento com um anticorpo de detecção correspondente pode melhorar a sensibilidade para formatos sanduíche; valide usando padrões de proteína recombinante.
• Sempre inclua controles negativos apropriados (por exemplo, lisados de knockout ou tecidos com baixa expressão) para confirmar a especificidade.

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