Anticorpo policlonal de coelho anti-GPX3 para WB e ELISA - P22352

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da GPX3

• A glutationa peroxidase 3 (GPX3) é uma enzima selenoproteica pertencente à família das glutationa peroxidases, também conhecida como glutationa peroxidase extracelular ou plasmática (GPx-P/GSHPx-P).
• Ela catalisa a redução do peróxido de hidrogênio, dos peróxidos lipídicos e dos hidroperóxidos orgânicos utilizando a glutationa como agente redutor, protegendo assim as células e as enzimas contra danos oxidativos.
• A presença de um resíduo de selenocisteína (Sec) em seu sítio ativo é fundamental para sua atividade peroxidase; portanto, a GPX3 é classificada como uma selenoproteína.
• A GPX3 é uma proteína secretada, encontrada principalmente no plasma, onde contribui para a defesa antioxidante sistêmica ao desintoxicar peróxidos no ambiente extracelular.
• Ela é sintetizada como um precursor com um peptídeo-sinal, que direciona sua secreção; a proteína madura tem peso molecular de aproximadamente 26 kDa (25,5 kDa calculados).
• Foram realizados estudos estruturais tridimensionais e sequenciamento direto da proteína, confirmando sua identidade e seus sítios funcionais.
• Palavras-chave: Oxidorredutase, peroxidase, proteoma de referência e identificação proteômica de alta confiança.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 1-100 da GPX3 humana (NP_002075.2); essa região N-terminal inclui o peptídeo-sinal e parte da proteína madura, podendo gerar anticorpos que reconheçam tanto as formas precursora quanto madura.
• Para Western blot (WB), considere utilizar condições desnaturantes e redutoras e valide a detecção da GPX3 endógena em extratos de plasma/tecido de camundongo ou rato, considerando a reatividade cruzada relatada.
• O peso molecular previsto é de 26 kDa; a porcentagem apropriada do gel (por exemplo, SDS-PAGE a 12%) e as condições de transferência devem ser otimizadas; pode ser observada uma banda próxima de 26 kDa.
• Para aplicações em ELISA, pode-se utilizar o revestimento com GPX3 recombinante ou GPX3 plasmática capturada; os anticorpos policlonais podem exigir uma titulação cuidadosa para garantir a especificidade.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, a variabilidade entre lotes deve ser monitorada, e controles apropriados (por exemplo, amostras knockout e pré-adsorção com peptídeo) podem auxiliar na confirmação da especificidade.

CamelBio: sua ponte de fornecimento completa

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