Anticorpo Policlonal Anti-GRASP65 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9BQQ3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GRASP65 (GORASP1)

• GRASP65 (GORASP1, GOLPH5) é uma proteína estrutural chave do aparelho de Golgi, pertencente à família GORASP. O splicing alternativo produz múltiplos isoformas. (Palavras-chave: Splicing alternativo)
• É necessário para a formação e manutenção da fita de Golgi, atuando em conjunto com GORASP2/GRASP55. Também desempenha um papel na montagem e empilhamento de membranas das cisternas, e na remontagem das pilhas de Golgi após a desintegração mitótica.
  Referências relacionadas:
  PMID:33301566
• O clivagem do GRASP65 mediada por caspases é necessária para a fragmentação do Golgi durante a apoptose. (Por similaridade)
• GRASP65 media, via interação com GOLGA2/GM130, a ancoragem de vesículas de transporte com membranas do Golgi.
  Referências relacionadas:
  PMID:16489344
• Facilita o tráfego não convencional induzido por estresse do RE do CFTR glicosilado no núcleo para a membrana celular.
  Referências relacionadas:
  PMID:21884936
• Subcelularmente, o GRASP65 localiza-se no aparelho de Golgi, especificamente na membrana da rede cis-Golgi e na membrana do compartimento intermediário retículo endoplasmático-Golgi.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, miristoilação e ligação ao zinco. A proteína é uma fosfoproteína, lipoproteína e proteína de ligação a metais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 221–440 do GRASP65 humano, localizado na região C-terminal. Ao prever o reconhecimento do isoforma, considere possíveis variantes de splice que afetem este domínio.
• Para Western blotting (WB), valide o anticorpo em linhagens celulares humanas; o GRASP65 endógeno migra aproximadamente a 46 kDa. Fragmentos de clivagem podem aparecer durante a apoptose — use controles apropriados (por exemplo, células tratadas com estaurosporina).
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), otimize a fixação (por exemplo, metanol ou paraformaldeído) e a permeabilização para obter coloração clara do Golgi. A co-coloração com um marcador de Golgi (por exemplo, GM130) é recomendada.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; faça titulação para determinar a concentração ideal para o seu sistema de ensaio.

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