Anticorpo Policlonais Anti-GRHL2 para WB e ELISA - Q6ISB3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GRHL2

• GRHL2 (homólogo da proteína Grainyhead-like 2), também conhecida como Brother of mammalian grainyhead (BOM) ou Fator de transcrição CP2-like 3, é um fator de transcrição que se liga à sequência consenso de DNA 5'-AACCGGTT-3' e atua tanto como ativador quanto repressor de genes alvo (Por similaridade).
• Desempenha um papel essencial na neurulação primária e no desenvolvimento epitelial; coopera com GRHL3 no estabelecimento de zonas de fechamento distintas, sendo essencial para o fechamento do prosencéfalo rostral (PubMed:25152456, PubMed:29309642).
  Referências relacionadas: PMID:25152456 PMID:29309642
• Como regulador mestre da morfogênese epitelial, GRHL2 upregula componentes de junções apertadas (CLDN3, CLDN4) e RAB25, aumentando a localização de CLDN4; também estabelece níveis apropriados de expressão de CDH1 em vários epitélios (Por similaridade).
• Apresenta redundância funcional com GRHL3 na morfogênese epidérmica e reparo de feridas; no pulmão, forma um ciclo regulatório com NKX2-1 para coordenar a diferenciação das células epiteliais (Por similaridade).
• Em queratinócitos, GRHL2 ativa a telomerase ao se ligar ao promotor de TERT e inibir a metilação do DNA em sua ilha CpG 5', potencialmente por interferir na atividade de DNMT1 (PubMed:19015635, PubMed:20938050).
  Referências relacionadas: PMID:19015635 PMID:20938050
• Por outro lado, impede a diferenciação de queratinócitos ao reprimir epigeneticamente genes do complexo de diferenciação epidérmica (EDC), bem como GRHL1 e GRHL3 (PubMed:23254293).
  Referências relacionadas: PMID:23254293
• Subcelularmente, GRHL2 se localiza no núcleo e na membrana, o que é consistente com seus papéis na regulação da transcrição e das junções celulares.
• É altamente expressa na placenta, próstata, cérebro, rim e inúmeros tecidos epiteliais; também detectada na cóclea e em células epiteliais da córnea (PubMed:29499165). Mutações em GRHL2 estão associadas a distrofia corneal (PPCD4), surdez não sindrômica (DFNA28) e displasia ectodérmica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno deste anticorpo corresponde aos aminoácidos 80–250 da GRHL2 humana (NP_079191.2), uma região que abrange parte do domínio N-terminal. Essa sequência é conservada em ratos (reatividade cruzada confirmada), mas pesquisadores devem verificar a reatividade em outras espécies por alinhamento de sequência.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto da GRHL2 é de ~71 kDa; no entanto, modificações pós-traducionais ou variações de isoforma podem resultar em bandas adicionais. Otimize os controles de carregamento e as condições de bloqueio.
• Em ELISA, considere usar uma curva padrão de peptídeo ou proteína recombinante para quantificação. Devido à natureza policlonal, a consistência entre lotes deve ser validada para resultados reprodutíveis.
• Ao detectar GRHL2 endógena em células ou tecidos epiteliais (ex.: pele, pulmão, rim), protocolos de extração nuclear podem enriquecer o sinal. Valide a especificidade por silenciamento com siRNA ou teste paralelo com linhas celulares negativas conhecidas.

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