Anticorpo monoclonal anti-GRK2 [Validado por KO] para WB, IF/ICC, ELISA - P25098

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da GRK2

• A GRK2 (quinase 2 de receptores acoplados à proteína G), também conhecida como quinase 1 do receptor beta-adrenérgico (BARK1), é uma quinase de serina/treonina que fosforila especificamente os receptores acoplados à proteína G (GPCRs) ativados, iniciando a internalização e a dessensibilização dos receptores mediadas por β-arrestina (PubMed:14976224, PubMed:16179383, PubMed:19306925). Referências relacionadas: PMID:14976224 PMID:16179383 PMID:19306925
• Ela fosforila a forma ocupada por agonista dos receptores beta-adrenérgicos (ADRB2) e receptores relacionados de catecolaminas, regulando as respostas da frequência de contração dos cardiomiócitos e promovendo a dessensibilização dos receptores (PubMed:19715378). Referências relacionadas: PMID:19715378
• A GRK2 dessensibiliza os receptores de anafilatoxinas C3AR1 e C5AR1 após a ligação do ligante, modulando as respostas das células imunes (PubMed:21799898, PubMed:23077507). Referências relacionadas: PMID:21799898 PMID:23077507
• Ela regula positivamente a via de sinalização ciliar do smoothened (SMO) por meio da fosforilação de SMO (facilitando seu transporte para o cílio) e de GPR161 (promovendo sua exportação ciliar), eventos essenciais na sinalização Hedgehog (PubMed:39138140, PubMed:40384633). Referências relacionadas: PMID:39138140 PMID:40384633
• A GRK2 modula a sinalização de LPAR1 competindo com RALA pela ligação ao receptor, afetando as propriedades de sinalização e dessensibilizando LPAR1/LPAR2 de maneira independente de fosforilação (PubMed:19306925). Referências relacionadas: PMID:19306925
• Subcelularmente, a GRK2 está localizada no citoplasma, na membrana celular, nas projeções celulares (incluindo a membrana ciliar) e nos compartimentos sinápticos (pós-sináptico e pré-sináptico), refletindo seus diversos papéis regulatórios.
• A expressão tecidual é detectada em leucócitos do sangue periférico, destacando sua importância nos sistemas imune e cardiovascular.
• As principais características moleculares incluem ligação ao ATP, ligação a nucleotídeos, atividade de quinase, fosforilação e atividade de transferase, conforme anotado no UniProt.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo dentro dos resíduos 590–689, sugerindo o reconhecimento de um epítopo linear; espera-se que a transferência Western desnaturante (WB) e o ELISA funcionem bem.
• A validação por KO indica alta especificidade; considere utilizar lisados de células knockout para GRK2 como controle negativo em WB para confirmar a identidade da banda.
• Prevê-se uma banda de aproximadamente 80 kDa; valide sua migração no sistema de amostra utilizando marcadores de peso molecular apropriados.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), a GRK2 apresenta marcação membranar e citoplasmática; assegure uma permeabilização adequada e considere a cotinuição com marcadores de organelas.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato torna este anticorpo adequado para estudos em organismos-modelo comuns; verifique o sinal em tecidos ou linhagens celulares relevantes.
• Como a GRK2 está envolvida na dessensibilização de GPCRs, ensaios funcionais (por exemplo, internalização de receptores ou recrutamento de β-arrestina) podem complementar os experimentos de detecção.

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