Anticorpo Policlonal Anti-GRK5 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P34947

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GRK5

• Codificada pelo gene GRK5 (também conhecido como GPRK5), a GRK5 é um membro da família das quinases de receptores acoplados à proteína G (GRK) que fosforila especificamente GPCRs ativados, iniciando a dessensibilização e internalização por meio do recrutamento de beta-arrestina.
• Além dos GPCRs, a GRK5 fosforila múltiplos substratos não receptores, incluindo ST13 (regulando o tráfego de receptores de quimiocinas), TP53/p53 (inibindo a apoptose), HDAC5 (promovendo a exportação nuclear e aumentando a transcrição mediada por MEF2), ARRB1 e até mesmo LRP6 na via de sinalização Wnt.
• Subcelularmente, a GRK5 se localiza dinamicamente no citoplasma, núcleo e membrana celular, o que é consistente com seus papéis na regulação de receptores da membrana plasmática e modulação da transcrição nuclear.
• A distribuição tecidual é ampla, mas com enriquecimento: os níveis mais altos são detectados no coração, placenta e pulmão, com expressão moderada no músculo esquelético, cérebro, fígado, pâncreas e rim.
• A atividade quinásica é dependente de ATP, e a proteína contém domínios de ligação a lipídios, permitindo a associação com a membrana; também é uma fosfoproteína sujeita a modificações regulatórias.
• Palavras-chave funcionais incluem sinalização de apoptose, participação na via Wnt e atividade de serina/treonina quinase, destacando seus papéis multifuncionais na sinalização celular e na doença.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, prepare lisados de células inteiras de tecidos com alta expressão de GRK5 (por exemplo, coração, pulmão). Uma banda de aproximadamente 68 kDa é esperada em condições redutoras; valide com um lisado de controle positivo.
• Na imunohistoquímica (IHC-P), pode ser utilizada recuperação de antígeno padrão (por exemplo, tampão de citrato pH 6,0); inclua tecidos positivos conhecidos, como músculo cardíaco, e controles negativos para avaliar a especificidade.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), podem ser utilizadas linhas celulares que expressam GRK5 endogenamente. As condições de fixação/permeabilização devem ser otimizadas, e estudos de colocalização com marcadores de membrana ou nucleares podem confirmar a dinâmica de localização.
• Como um anticorpo policlonal, recomenda-se verificar a consistência entre lotes para ensaios quantitativos como o ELISA. Utilize a proteína GRK5 recombinante como padrão.

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