Anti-GSDMD (Comprimento Total + Terminal C) Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9D8T2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Gasdermina-D

• A Gasdermina-D (GSDMD) é um precursor de uma proteína formadora de poros crucial para a piroptose e imunidade inata. É clivada por caspases inflamatórias (CASP1, CASP4/CASP11) após ativação do inflamassoma, liberando o fragmento N-terminal ativo. Referências relacionadas: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:26611636
• O fragmento N-terminal clivado da GSDMD transloca-se para a membrana plasmática, liga-se a fosfoinositídeos e cardiolipina, e oligomeriza-se formando poros de 10–15 nm. Isso permite a liberação de IL-1β, IL-18 e caspase-7 maduras, executando assim a piroptose. Referências relacionadas: PMID:27339137 PMID:27383986 PMID:29195811 PMID:29274245 PMID:35705808
• A GSDMD também forma poros nas membranas mitocondriais, desencadeando a liberação de mtDNA, e pode matar diretamente bactérias extracelulares através de sua atividade formadora de poros. Referências relacionadas: PMID:37001519 PMID:27383986
• No intestino delgado superior, a clivagem pela caspase-3/7 produz um fragmento da GSDMD que atua como um coativador de transcrição para o STAT1, regulando positivamente a CIITA e o MHC-II para manter a tolerância alimentar. Referências relacionadas: PMID:37327784
• A clivagem da GSDMD induzida por alérgenos pela papaína impulsiona a liberação de IL-33, promovendo respostas inflamatórias do tipo 2. Referências relacionadas: PMID:35794369 PMID:35749514
• A GSDMD pertence à família das gasderminas (também conhecida como Gsdmdc1); no camundongo, é altamente expressa em células endoteliais cerebrais e tem um peso molecular previsto de ~53 kDa.
• Localização subcelular: a GSDMD inativa de comprimento total é predominantemente citosólica; após a clivagem, o fragmento N-terminal localiza-se na membrana plasmática, mitocôndrias e também é secretado.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante da Gasdermina D de camundongo de comprimento total (NP_081236.1); espera-se que o anticorpo detecte tanto a GSDMD de comprimento total quanto o fragmento C-terminal.
• Para WB, a GSDMD de comprimento total migra a ~53 kDa, o fragmento N-terminal a ~31 kDa e o fragmento C-terminal a ~22 kDa. Valide esses padrões em linhagens celulares ou tecidos de camundongo relevantes.
• Em IF/ICC e IHC-P, confirme a especificidade do anticorpo usando controles apropriados (por exemplo, amostras com knockout ou knockdown de GSDMD).
• Para ELISA, realize uma curva padrão com proteína GSDMD recombinante para otimizar a sensibilidade e a faixa de detecção.
• Observe que a reatividade cruzada é relatada para camundongo; testes contra outras espécies podem exigir validação independente.

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