Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-GSDMD (Comprimento total+Terminal N) para WB, IF/ICC, ELISA - P57764

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Gasdermina-D

• Gasdermina-D (GSDMD) é um membro da família das gasderminas, alternativamente denominada proteína 1 contendo domínio de gasdermina, codificada pelo gene GSDMD (também conhecido como DFNA5L, GSDMDC1, FKSG10). Sua função principal é o precursor de uma proteína formadora de poros essencial para a piroptose e a defesa do hospedeiro contra patógenos.
• Após a ativação do inflamassoma canônico ou não canônico, as caspase inflamatórias (CASP1, CASP4, CASP5) clivam o GSDMD, liberando o fragmento formador de poros do terminal N da autoinibição.
  Referências relacionadas: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27418190
• O fragmento do terminal N liberado transloca para a membrana plasmática, ligando-se fortemente a fosfoinositídeos (ex.: PI4P, PI(4,5)P2), ácido fosfatídico e fosfatidilserina, mas não a fosfolipídios não carregados, onde se oligomeriza em poros de 10 a 15 nm.
  Referências relacionadas: PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980
• Esses poros mediam a liberação de IL-1β e IL-18 maduras, citocinas críticas para a resposta inflamatória, e também podem eliminar a caspase-7 madura e o DNA mitocondrial (mtDNA).
  Referências relacionadas: PMID:27281216 PMID:27418190 PMID:29898893
• Em alguns tipos de células, a morte celular por piroptose ocorre por meio da ativação a jusante da ninjurina-1 (NINJ1), levando à ruptura da membrana plasmática.
  Referências relacionadas: PMID:33472215 PMID:37198476
• Além de seu papel lítico, os fragmentos do terminal N do GSDMD podem matar diretamente bactérias Gram-negativas e Gram-positivas extracelulares e, em condições de cultura celular, restringir patógenos intracelulares como o Listeria monocytogenes.
  Referências relacionadas: PMID:27281216
• No intestino delgado, a clivagem por CASP3 ou CASP7 produz um coativador de transcrição que transloca para o núcleo, parcerizando com STAT1 para induzir a expressão de CIITA e MHC classe II, mantendo assim a tolerância alimentar. (Por similaridade)
• A clivagem pelo alergeno da papaína também gera o fragmento do terminal N formador de poros, que libera especificamente a IL-33 madura, promovendo a imunidade do tipo 2.
  Referências relacionadas: PMID:35794369
• O GSDMD é amplamente expresso, com presença notável em células esofagianas suprabasais e no ístmo/pescoço gástrico, fossa e glândula, e se localiza no citoplasma, inflamassoma, membrana plasmática, mitocôndrias e núcleo sob várias condições.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o anticorpo reconhece um epitopo entre os aminoácidos 154-252 do domínio do terminal N; portanto, tanto o GSDMD de comprimento total (previsto ~53 kDa) quanto o fragmento clivado do terminal N (~31-34 kDa) podem ser detectados. Valide no sistema de amostra relevante e considere usar lisados de células ativadas por inflamassoma para observar os produtos de clivagem.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica, o GSDMD pode se localizar no citoplasma, membrana plasmática e núcleo dependendo do estado de ativação. Recomenda-se a otimização das condições de permeabilização e fixação. Inclua controles apropriados para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, a natureza policlonada permite o uso potencial como anticorpo de captura e detecção em formatos de ELISA sanduíche. O pareamento com um anticorpo monoclonal específico para um epitopo distinto pode melhorar a sensibilidade. Recomenda-se a curva padrão usando proteína recombinante.

CamelBio: Sua Ponte de Aquisição One-Stop

A CamelBio atua como uma parceira completa de matérias-primas para IVD, fornecendo pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados e reagentes auxiliares a granel para fabricantes de diagnósticos e laboratórios de pesquisa. Na área de piroptose e imunidade inata, podemos adquirir os materiais necessários para o desenvolvimento de ensaios relacionados ao GSDMD, incluindo anticorpos de alvos raros e proteínas recombinantes. Nossa plataforma simplificada ajuda a preencher a lacuna entre o conceito e a clínica, garantindo uma cadeia de suprimento confiável para seus projetos de IVD.