Anticorpo Policlonal Anti-GSDMD para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P57764

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GSDMD

• O GSDMD é uma proteína precursora formadora de poros e um executor-chave da piroptose a jusante da ativação do inflamassoma.
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• A clivagem proteolítica pela caspase‑1, ‑4 ou ‑5 libera o domínio N‑terminal, que se oligomeriza em poros de 10–15 nm na membrana plasmática.
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• Esses poros medeiam a secreção de IL‑1β e IL‑18 maduras, desencadeando a morte celular inflamatória (piroptose).
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• O fragmento N‑terminal liga-se especificamente a fosfolipídios ácidos como cardiolipina, fosfatidilinositol fosfatos, ácido fosfatídico e fosfatidilserina, mas não a lipídios neutros.
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• O GSDMD exerce atividade bactericida direta formando poros em bactérias Gram‑positivas e Gram‑negativas.
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• A clivagem pela papaína do alérgeno gera um fragmento que libera seletivamente a IL‑33, impulsionando a imunidade do tipo 2.
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• Uma variante de clivagem dependente de caspase‑3/7 no intestino delgado atua como um coativador de transcrição, promovendo tolerância imunológica via indução de CIITA e MHC‑II.
• O GSDMD é abundantemente expresso em células epiteliais em diferenciação do esôfago e estômago, e localiza-se no citosol, inflamassoma, membrana plasmática, mitocôndrias e núcleo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde aos aminoácidos 346–484 do GSDMD humano, direcionando-se à porção C‑terminal; portanto, o anticorpo reconhece a forma de comprimento total (~53 kDa) e o fragmento C‑terminal clivado pela caspase (~30 kDa), mas não o domínio N‑terminal formador de poros.
• No Western blot, espera-se uma banda dominante em aproximadamente 53 kDa; após a ativação do inflamassoma, uma banda menor (~30 kDa) representando o produto de clivagem C‑terminal também pode ser visível.
• Para imunofluorescência e imuno-histoquímica, otimize a fixação e a permeabilização para detectar o GSDMD em suas múltiplas localizações subcelulares (citosol, membrana, mitocôndrias, núcleo).
• Este anticorpo policlonal é bem adequado para imunoprecipitação do GSDMD de comprimento total e seus parceiros de ligação.
• Em sistemas ELISA, ele pode servir como anticorpo de captura ou detecção; o emparelhamento com um anticorpo GSDMD específico para o N-terminal permite discriminar entre as formas intactas e processadas.

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