Anti-GSDME (Comprimento total + Terminal N) Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60443

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GSDME

• A GSDME (DFNA5/ICERE-1), codificada pelo gene GSDME, é uma proteína precursora formadora de poros da família gasdermina que converte apoptose não inflamatória em piroptose.
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• Após clivagem pela caspase-3 (CASP3) ou granzima B (GZMB), o fragmento N-terminal transloca para a membrana plasmática, oligomeriza e forma poros com diâmetro interno de 10–15 nm, facilitando a liberação de IL-1β e IL-18 e desencadeando morte celular piroptótica.
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• A GSDME atua como um interruptor crítico que converte a apoptose induzida por TNF ou quimioterapia em piroptose, e está envolvida na necrose secundária durante infecções virais.
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• A proteína exibe atividade bactericida e contribui para a necrose secundária a jusante da via apoptótica mitocondrial.
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• Como um supressor de tumor, a GSDME facilita a piroptose mediada por granzima B em células tumorais, promovendo assim uma imunidade anti-tumor robusta e regressão tumoral por células natural killer.
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• A GSDME é expressa na cóclea e em muitos outros tecidos, com maior expressão na placenta; mutações causam perda auditiva não sindrômica autossômica dominante (DFNA5).
  Referências relacionadas: PMID:9771715
• O splicing alternativo produz múltiplos isoformas com pesos moleculares de aproximadamente 11, 35 e 55 kDa.
• A GSDME de comprimento total localiza-se predominantemente no citoplasma e citosol; após clivagem, o fragmento N-terminal associa-se à membrana celular para executar sua função formadora de poros.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para análise de Western blot (WB), espere bandas correspondentes aos isoformas da GSDME em aproximadamente 11, 35 e 55 kDa. Use controles positivos, como linhagens celulares tratadas com indutores de piroptose (por exemplo, agentes de quimioterapia), para confirmar a detecção específica.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), a otimização das condições de recuperação antigênica e permeabilização pode ser necessária. Valide a especificidade do anticorpo usando peptídeo de bloqueio ou tecido de modelos knockout quando possível.
• Para ELISA e outros ensaios quantitativos, considere emparelhar este anticorpo policlonal com um anticorpo de detecção monoclonal correspondente para um design de ensaio sanduíche robusto.
• Como um anticorpo policlonal de coelho, a consistência entre lotes deve ser verificada para experimentos críticos. A execução de controles negativos apropriados (por exemplo, apenas anticorpo secundário) é recomendada para avaliar a coloração de fundo.

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