Anticorpo Monoclonal Anti-GSK3β para Citometria de Fluxo (Intracelular) - P49841

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da GSK3β

• A GSK3β é uma quinase serina/treonina constitutivamente ativa que atua como um regulador negativo no controle hormonal da homeostase da glicose, sinalização Wnt e regulação de fatores de transcrição e microtúbulos, fosforilando substratos como a glicogênio sintase, β-catenina e Tau. Referências relacionadas: PMID:11430833 PMID:12554650 PMID:14690523
• Ela requer fosforilação prévia da maioria dos substratos; no músculo esquelético, fosforila e inibe a glicogênio sintase (GYS1), regulando a síntese de glicogênio e potencialmente contribuindo para a resistência à insulina. Referências relacionadas: PMID:8397507 PMID:11430833 PMID:16484495
• Na sinalização Wnt, a GSK3β forma um complexo com APC, AXIN1 e β-catenina, fosforilando a β-catenina para promover sua degradação mediada por ubiquitina. Referências relacionadas: PMID:12554650
• A GSK3β fosforila a Tau (MAPT) na Thr-548, reduzindo a ligação aos microtúbulos; a Tau é um componente principal dos emaranhados neurofibrilares na doença de Alzheimer, e a GSK3β colocaliza-se com a Tau e PKR em cérebros com Alzheimer. Referências relacionadas: PMID:14690523
• Ela regula o relógio circadiano fosforilando as proteínas centrais do relógio BMAL1, CLOCK e PER2, direcionando-as para degradação proteassomal. Referências relacionadas: PMID:19946213 PMID:28903391
• A GSK3β localiza-se no citoplasma, núcleo e membrana celular; expressa-se altamente em testículo, timo, próstata, ovário e fracamente em pulmão, cérebro, rim. O gene sofre splicing alternativo, e a proteína é modificada por fosforilação, ADP-ribosilação e palmitoilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo tem como alvo um epítopo intracelular; fixação e permeabilização são necessárias para citometria de fluxo intracelular. Otimize as condições de permeabilização para o seu tipo celular.
• Valide a expressão de GSK3β em linhagens celulares relevantes (ex.: HEK293, HeLa) usando controles positivos e negativos para confirmar a especificidade da coloração.
• Use controles de isotipo apropriados e titue o anticorpo conjugado para minimizar o fundo e otimizar a relação sinal-ruído.
• Como o imunogênio abrange os aminoácidos 321-420 próximos ao C-terminal, garanta que a acessibilidade do epítopo não esteja mascarada por interações ou modificações proteicas.
• Verifique as configurações de compensação se usar em painéis multicolor; consulte guias de sobreposição espectral do corante de referência.
• Nenhum dado de reatividade cruzada é fornecido; verifique a compatibilidade com a espécie-alvo ou linhagem celular de interesse.

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